第八周周一生物化学の第十六章 RNA 生物合成 (转录) 2014.4.ppt

Central Dogma 描述遗传信息流动的方向 转录与复制的相似点： 　1. 模板均为DNA； 2. 都需依赖DNA的聚合酶 　3. 延长机理都是形成磷酸二酯键； 　4. 方向均为5′→3′; 5. 遵从碱基配对规律。　 转录和复制的区别 转录的模板和酶 Templates and Enzymes 一、转录模板 不对称转录 　　(asymmetric transcription) 在DNA分子双链上某一区段，一股链可转录，另一股链不转录； 模板链并非永远在同一单链上。 转录产物RNA的碱基序列，除了 T 变U 外，其余与编码链相同。 二、RNA聚合酶（DDRP） 1. 原核生物的RNA聚合酶 E.coli的RNA聚合酶是由四种亚基组成的六聚体（ ?2 ? ?? ??） E. coli RNA聚合酶组分 　　其他原核生物的RNA聚合酶，在结构、组成、功能上均与E.coli相似。 　　原核生物的 RNA聚合酶都受一类抗 结核药利福平或利福霉素的特异性抑制。这类药物能与RNA聚合酶的?亚基特异结合，从而影响酶的活性。 2. 真核生物的RNA聚合酶 　　　RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都由多个 亚基组成。有些亚基是三种酶所共有。 　　mRNA是各种RNA中寿命最短、 最不稳定的，需经常重新合成。因此RNA聚合酶Ⅱ是三种酶中最活跃的。 RNA聚合酶保护法 转录过程 Process of Transcription 分为三个阶段： 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination) 一、原核生物的转录过程 （一）转录起始 转录泡（transcription bubble）： 在转录延长过程中，由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA三者结合在一起的复合体，为空泡状结构，又称转录复合物。 (三) 转录终止 　　RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 　　　 　　　 1. 依赖ρ因子的转录终止 ? 因子是同六聚体蛋白（亚基分子量46KD）； ? 因子能结合RNA，与poly C的结合力最强； ? 因子还有ATP酶和解螺旋酶的活性。 2. 不依赖ρ因子的转录终止 　DNA模板上靠近终止处，有特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 二、真核生物的转录过程 　 参与RNA-pol Ⅱ转录的TFⅡ 真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional modification 一、mRNA的转录后加工 (一) 首尾的修饰 5′-端加帽：m7GpppG—— 3′-端加尾：多聚腺苷酸 (poly A) 帽子结构 　 加尾(adding tail) 复习思考题： 1. 概念 （1）转录 （2）不对称转录 （3）结构基因 （4）核心酶 （5）外显子 （6）内含子 （7）模板链 （8）启动子 （9）Pribnow盒 2. 复制与转录的异同点。 3. RNA聚合酶与DNA聚合酶作用的异同点。 4. 试述原核生物启动子的结构特点及功 能。 5. 原核生物与真核生物RNA聚合酶有何异 同？ 6. 原核生物与真核生物的转录终止有何不 同？ 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 20世纪70年代末, 基因断裂性概念 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) 非编码区 A~G 编码区1~7 鸡卵清蛋白基因：第一个被详细研究的断裂基因 2. 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 Transcription and past-transcribed modification for albumin gene A B C D E F G L 1 2 3 4 5 6 7 5’ 47 185 51 1