【创新设计】2015-2016学年高二生物人教版选修3学案与检测：专题1 第1课时 DNA重组技术的基本工具 Word版含解析.docxVIP

第1课时　DNA重组技术的基本工具 [目标导读]　1.结合课本插图，简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。2.结合教材P6图1－5，简述基因工程中载体需要具备的条件。 [重难点击]　DNA重组技术三种基本工具的作用和特点。 1．DNA分子的组成 2．DNA的平面结构 (1)配对的碱基，A与T之间形成两个氢键，G与C之间形成三个氢键。C—G比例越大，DNA分子结构越稳定。 (2)脱氧核苷酸聚合形成长链的过程中产生水，即脱氧核苷酸→DNA＋H2O。 (3)○和之间的化学键为磷酸二酯键。 (4)?—?之间的化学键为氢键，可用解旋酶断裂，也可加热断裂。 (5)每个脱氧核糖连接着2个磷酸，分别在3号、5号碳原子上相连接。 3．基因与DNA的关系 从上图可知，S基因是有遗传效应的DNA片段。 [课堂导入]　 如图为“黄金水稻”，是将类胡萝卜素基因导入水稻内培育而成的，这种技术就是基因工程，是一种精细的DNA拼接技术，需要一些特殊的工具才能进行，今天我们就来学习DNA重组技术的基本工具。 探究点一　基因工程的概念及工具酶 1．基因工程的概念 图1为我国拥有自主知识产权的转基因抗虫棉，就是通过精心设计，用“分子工具”构建成的。培育抗虫棉首先要在体外对含有抗虫基因的DNA分子进行“切割”、改造、修饰和“拼接”，然后，导入棉花体细胞内，并使重组DNA在细胞中表达。 由上述资料填写下表，理解基因工程的概念。 操作对象基因(DNA)操作环境生物体外操作水平DNA分子水平技术手段DNA重组和转基因等技术目的创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品2.基因工程的工具酶 (1)“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) ①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 小贴士　限制酶所识别序列的特点 呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到一条中心轴线，如图所示，中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。如eq \b\lc\ \rc\|(\a\vs4\al\co1(GCCG))GCCG以中心线为轴，两侧碱基互补对称；CGCGATGCGC以AT为轴，两侧碱基互补对称。③作用结果：形成DNA片段末端。 a．黏性末端 是限制性核酸内切酶在识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的，如图所示。 b．平末端 是限制性核酸内切酶在识别序列的中心轴线处切开时形成的，如图所示。 ④观察图2，说明限制酶切割的位置在2、4(处)。 (2)“分子缝合针”——DNA连接酶 ①作用：将双链DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来。 ②DNA连接酶种类和作用的区别 种类来源作用E·coli DNA 连接酶大肠杆菌缝合黏性末端被切开的磷酸二酯键，不能连接平末端T4 DNA连接酶T4噬菌体缝合黏性末端和平末端，但平末端之间连接的效率比较低归纳提炼 1．DNA连接酶与限制性核酸内切酶的比较 (1)区别 作用应用限制性核酸内切酶使特定部位的磷酸二酯键断裂用于提取目的基因和切割载体DNA连接酶在DNA片段之间重新形成磷酸二酯键用于基因表达载体的构建(2)两者的关系可表示为： 2．DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 DNA连接酶DNA聚合酶相同点催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不 同 点模板不需要模板需要DNA的一条链为模板作用对象游离的DNA片段单个的脱氧核苷酸作用结果形成完整的DNA分子形成DNA的一条链用途基因工程DNA分子复制活学活用 1．下图为DNA分子的切割和连接过程，据图回答下列问题。 (1)EcoRⅠ是一种____________酶，其识别序列是________________，切割位点是___________与___________之间的___________键。切割结果产生的DNA末端片段形式为_____________。 (2)不同来源的DNA片段结合，在这里需要的酶是__________连接酶，此酶的作用是在__________和________之间形成__________键而起缝合作用的。还有一种连接平末端的连接酶是__________。 答案　(1)限制性核酸内切　GAATTC　鸟嘌呤脱氧核苷酸　腺嘌呤脱氧核苷酸　磷酸二酯　黏性末端 (2)E·coliDNA　鸟嘌呤脱氧核苷酸　腺嘌呤脱氧核苷酸　磷酸二酯　T4DNA连接酶 解析　限制酶能识别特定的核苷酸序列(碱基序列)，并使两个特定核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，DNA连接酶的作用是将不同来源的DNA片段连接起来。 方法链接　与D