医院环境卫生监测方法和报告方式新进展剖析.pptVIP

四、使用中消毒液染菌量测定 1、消毒剂的采样和稀释 用无菌吸管或注射器按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL含中和剂的各类稀释液 中和剂中所用PBS液为： 0.03mol/L的pH7.2~7.4磷酸盐缓冲液 (PBS)，配法见前。 2、中和剂的选择 ◆醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和； ◆含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含 0.1%硫代硫酸钠的PBS液中和； ◆洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂的PBS液中和； ◆醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸的PBS液中和； ◆含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中加入吐温80至3%（W/V)；也可使用该消毒剂消毒效果检测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。 3、检测方法 （采样后须4小时内外理完标本） 1、用无菌吸管吸取一定稀释比例（如1∶10)的中和后混合液1. mL加到无菌空平皿中，再将冷至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL～20mL，36℃±1℃恒温箱培养72h，计数菌落数；必要时分离致病性微生物，进行目标微生物的检测。 2、消毒液染菌量(cfu/ml)＝平均每皿菌落数×10 （1）计算菌落数为0时，报告为：无菌生长 （2）0＜计算菌落数≤100时，报告为：实际菌落数cfu/ml （3）计算菌落数＞100时，报告为：菌落数＞ 10