分子生物学所有试题总结 新(11.25).docVIP

一、名词解释 1、表达蛋白质组学：指某种特定的细胞、组织或器官的全部蛋白质种类，即蛋白质组的表达模式。其研究的支撑技术是双向凝胶电泳分离技术和以质谱为代表的鉴定技术。 2、转基因技术：一般是指外源基因导入到生物体基因组中，引起生物体性状的可遗传修饰，是改变物种遗传性状的最根本途径。其可通过受精卵显微注射、逆转录病毒感染、精子载体及转座子元件介导等方法是实现。 3、基因表达调控：典型的基因表达是基因经过转录、翻译，产生有生物活性的蛋白质的过程，而对这个过程的调节即为基因表达调控。 4、启动子：是一段特定的直接与RNA聚合酶及其转录因子相结合并启动转录的DNA序列。 5、肿瘤生物标志物：指肿瘤组织和肿瘤细胞由于基因结构或基因表达改变所产生的异常表达的抗原或生物活性物质。 6、噬菌体展示技术：是以改造的噬菌体为载体，将待选基因片段定向插入噬菌体衣壳蛋白区，使外源多态或蛋白质表达并展示于噬菌体表面，进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体，最终获得具有特异性结合性质的多肽或蛋白质，并实现基因克隆化的一种重要分子生物学技术。 7、SNP：单核苷酸序列多态性，是指在基因组水平由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性，即基因组特定核苷酸位置上存在两种不同的碱基，其中最少一种在群体中的频率不小于1%。 8.DNA芯片：DNA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为DNA芯片 9. 感受态细胞（competent cell）：正常情况下，细胞的细胞膜具有选择通透性，并不允许大分子DNA进入。然而细菌若先暴露于高离子强度溶液或经短暂电休克等后，其细胞膜的通透性会增高，小部分细胞就能从外环境中摄入外源DNA，这部分细胞称为感受态细胞。 10.代表性差异分析：该技术是将消减杂交与PCR有机的结合，利用PCR以指数形式扩增双链模板，而以线性形式扩增单链模板的特性，通过消减和富集，使目的基因得到特异性扩增。 11.串联重复顺序多态性：有一些重复序列的重复单位很小，但串联重复次数有较大的变化，形成串联重复顺序多态性。主要发生在小卫星DNA和微卫星DNA中。这种多态性在人群中有极高的频率。 12. 限制性核酸内切酶：能识别DNA的特异序列，并在识别位点或其附近切割双链DNA的一类内切核酸酶，是基因克隆中最重要的工具酶，通常所说的限制酶是指2型酶。主要从原核细胞中提取，大多数限制性内切酶是错位切割双链DNA，产生粘性末端，部分酶则沿对称轴切割DNA而产生平端。 13. 、cDNA文库： cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板，逆转录形成的互补DNA（cDNA）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库。 14. RNA干扰技术是指由短的双链RNA诱导的同源RNA降解的过程,可使基因的表达受到抑制.它是在基因的转录后抑制基因表达的基因功能的方法. 蛋白样品的制备及定量； ②总蛋白的双向凝胶电泳（染色）； ③凝胶分析软件分析； ④胶内酶解（胰肽酶）； ⑤质谱分析（肽质量指纹图谱）； ⑥数据库搜索鉴定蛋白性质。 3、简述转基因动物技术及其基本流程 转基因动物技术：是将外源基因或体外重组的基因结构转移到动物的受精卵内，使其在动物体内得到整合和表达，以产生具有新遗传特征或性状的动物，并能将新的遗传信息稳定地遗传给后代，获得外源基因系或转基因群，或者是外源基因在特定调控元件的作用下在某些宿主组织中进行独立复制，并在一定时间内表达外源蛋白。 基本流程：①目的基因克隆和体外重组 1）人工合成 2）互补DNA（cDNA）的克隆 3）DNA克隆； ②外源基因的导入：将目的基因转入→培养→产下后代 ③外源DNA整合、转录及表达的分子检测是否是转基因动物。 4. 原核生物与真核生物的克隆基因在大肠杆菌中的表达有何不同？ 由于原核生物本身含核糖体结合位点，所以它的表达只需启动子，而真核生物基因及本身含较弱核糖体结合位点的原核基因的表达必须要有启动子和核糖体结合位点，才能高效表达载体。 5. 差异蛋白筛选及鉴定主要步骤 理想的分子标记的满足条件 简述克隆基因表达产物的检测方法。）抑制性消减杂交技术是一种以抑制性PCR 反应为基础，将标准化测试cDNA 单链步骤和消减杂交步骤合为一体的技术。通过合成两个不同的接头，接于经限制性内切酶消化后的测试cDNA 片段的5’末端，将测试和驱动进行两轮杂交