细胞增殖和活力剖析.pptVIP

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  • 2016-06-22 发布于湖北
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注意事项-时间点的设定 在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显)。 注意事项-培养时间 200ul的培养液对于10的4~5次方的增殖期细胞来说,很难维持68h,如果营养不够的话,细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止,影响结果,我们是在48h换液的。 ? 注意事项 MTT法只能测定细胞相对数和相对活力,不能测定细胞绝对数。做MTT时,尽量无菌操作,因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。 理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。 注意事项-避免血清干扰 用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加,会试验敏感性。 一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。? 谢谢! 细胞增殖和细胞活力 中心实验室 李娜 检测细胞增殖能力的方法 一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。 一种是间接的方法,即细胞活力(cell viability)检测方法,通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。 细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡

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