清华大学微生物学第六生长繁殖及控制剖析.ppt

第四节 微生物培养法概论 良好微生物培养装置的条件： 应在提供丰富而均匀的营养物质的基础上，能保证微生物获得适宜的温度和对绝大多数微生物所必需的良好通气条件（只有少数厌氧菌例外），此外，还要为微生物提供一个适宜的物理化学条件和严防杂菌的污染等。 第四节 微生物培养法概论 微生物培养技术的发展： ①从少量培养发展到大规模培养；②从浅层培养发展到厚层（固体）或深层（液体）培养；③从以固体培养技术为主发展到以液体培养技术为主；④从静止式液体培养发展到通气搅拌式的液体培养；⑤从单批培养发展到连续培养以至多级连续培养；⑥从利用分散的微生物细胞发展到利用固定化的细胞集团；⑦从单纯利用微生物细胞到大量培养、利用高等动、植物细胞；⑧从单菌发酵发展到混菌发酵；⑨从利用野生菌种发展到利用变异株以及“工程菌”；⑩低密度培养到高密度培养等等。 第四节 微生物培养法概论 一、实验室培养法 二、生产实践中培养微生物的装置 第四节 微生物培养法概论 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 实验室研究厌氧菌的三大重要技术: 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 一、实验室培养法 平行发酵罐 第四节 微生物培养法概论 二、生产实践中培养微生物的装置 二、生产实践中培养微生物的装置 第四节 微生物培养法概论 二、生产实践中培养微生物的装置 第四节 微生物培养法概论 二、生产实践中培养微生物的装置 第四节 微生物培养法概论 二、生产实践中培养微生物的装置 第四节 微生物培养法概论 第四节 微生物培养法概论 二、生产实践中培养微生物的装置 二、生产实践中培养微生物的装置 二、生产实践中培养微生物的装置 二、生产实践中培养微生物的装置 2. 湿热灭菌法——加压法 将待灭菌的物件放置在盛有适量水的加压蒸汽灭菌锅（或家用压力锅）内。把锅内的水加热煮沸，并把其中原有的空气彻底驱尽后将锅密闭。再继续加热就会使锅内的蒸气压逐渐上升，从而温度也上升到100℃以上。 2. 湿热灭菌法——加压法 为达到良好的灭菌效果，一般要求温度应达到121℃（压力为1kg／cm2或15磅／英寸2），时间维持15～20分钟，也可采用在较低的温度（115℃，即0.7kg／cm2或10磅／英寸2）下维持35分钟的方法。 2. 湿热灭菌法——加压法 此法适合于一切微生物学实验室、医疗保健机构或发酵工厂中对培养基及多种器材、物料的灭菌。 1.灭菌物体含菌量 不同的微生物个体（包括营养体和孢子）的耐热性是有差别的，所以，灭菌物体中的含菌量越高，杀死最后一个个体所需的时间就越长。 （2）灭菌锅内空气排除程度的影响 加压蒸汽灭菌法的原理是在驱尽锅内空气的前提下，通过加热把密闭锅内纯水蒸汽的压力升高而使蒸汽温度相应提高，也就是说是依靠温度而不是压力来达到灭菌的目的。因此，在一切利用加压蒸汽灭菌法的场合下，必须做到彻底排除灭菌锅内的残余空气。 （2）灭菌锅内空气排除程度的影响 （3）灭菌对象pH的影响 （4）灭菌对象的体积 （5）加热与散热的速度注意季节变化上磅下磅 2、湿热灭菌 2、湿热灭菌 对象：牛奶、啤酒、果酒或酱油等 For :高温会破坏食品的营养与风味 巴氏消毒法 具体方法 低温维持法：只要在63℃下维持30min 高温瞬时法：只要在72~85℃下维持15s 超高温法：只要120~140℃加热2~4秒 煮沸消毒 ? 一般用于饮用水的消毒（100℃下数分钟）。 对于某些培养基，由于高压蒸汽灭菌会破坏某些营养成分，可用间隙灭菌法灭菌，即流通蒸汽(或蒸煮)反复灭菌几次， 间隙灭菌法 第一次蒸煮后杀死微生物营养体，冷却，培养过夜，芽孢萌发，又第二次蒸煮，杀死营养体。这样反复2—3次就可以完全杀死营养体和芽孢，也可保持某些营养物质不被破坏。 常规加压蒸气灭菌法 2. 湿热灭菌法——（2）加压法 连续加压蒸气灭菌法 连续加压蒸气灭菌法 2. 湿热灭菌法——加压法 135~140℃下维持5~15s 优点：提高原料利用率、产品产量和质量 提高发酵罐利用率 提高锅炉利用率 宜于自动化操作 适用范围：大规模的发酵工厂中作培养基灭菌用 2. 湿热灭菌法——加压法 利用温度进行杀菌的定量指标？ （一） 高温灭菌的种类 热死时间 热死温度 某一温度下，杀死某微生物的 水悬浮液群体所需的最短时间 一定时间内，杀死某微生物的 水悬浮液群体所需的最低温度 二、物理灭菌因素的代表——高温 （二） 影响加压蒸气灭菌