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血涂片查疟原虫的一般流程 询问(病人外出史、症状、是否发热及发热时间) 采样 末梢血 制片 厚、薄血膜 读片 判断有无、类型(恶性及间日疟,其他不作要求) 报告 及时与医生联系,督促其报卡 上报市疾控中心复查(厚、薄血膜2张,EDTA抗凝血5ml) 采血的部位和方法 以末梢血为主。 以75%酒精棉球消毒耳垂待酒精干后,左手拇指和食指紧捏指头或耳垂,右手持一次性采血针迅速刺入,第一滴血不必擦掉,即可应用。 采血的血量 厚血膜血量约为5ul左右(即一小滴),涂成边缘光滑之园形,直径约0.8—1.0厘米左右。 薄血膜血量只需1.0-1.5ul左右,过多则血膜过厚过大。薄膜宜涂成舌状长约2.5厘米,宽约2厘米 采血的时间 进行疟疾普查时,在同一时间内常常需要检查很多居民,故一般无法考虑取血的时间。 但在诊断临床的疟疾患者时,就应当考虑在什么时候取血较为适宜,尤在确定不下虫种和查不到疟原虫的疑似疟疾患者的情况下。 采血的时间---间日疟 间日疟原虫及三日疟原虫,在患者刚发冷发热以后,大部是在环状滋养体期,故这一时期区别疟原虫种类是不容易的。虽在—般情况下,随便什么时间检查感染者的末稍血液,多少能查到各个时期的原虫,但适当的取血时间,一般是在患者发作数小时至十余小时,即已滋养发育至具有易于鉴别的晚期滋养体期. 采血的时间---恶性疟 恶性疟原虫,从理论上说,因为恶性原虫的裂体生殖是在内脏的毛细血管内进行的,所以在发作之前,患者的末稍血液中不易查到。但实际情况不尽如此,一般在受染者的末稍血液中,随时能见到少数恶性疟原虫的环状滋养体, 虽然如此,较理想的取血时间,是在发作后的20小时左右,因为这个时候,环状滋养体虽已滋长发育至最高峰,但尚未回至内脏的毛细血管中去进行裂体生殖。 环状滋养体的数量与构造,有助于疟原虫种类的鉴别。恶性疟原虫的配子体很易识别,但在初发时,一般需要在发作八日后才能在末稍血液中出现,应当注意 厚、薄血膜的形状和位置 薄血膜宽2cm,长2.5cm 厚血膜直径0.8-1cm 假定将玻片划成三格等分,则厚血膜应位于中格靠右侧线处,薄血膜则从玻片中央起至左格中部止,右端空格供记录姓名,编号或贴标签之用(如图) 标签 血片的制作1 玻片的执持方法: 无论在拭擦玻片,制作血片或染色血片时,手指仅可夹持玻片两侧缘,切匆触及玻片之上下面以免手上油脂污及玻片面,使薄血涂布不匀,厚血膜易于脱落 4、厚血膜涂制 取洁净的载玻片和推片各一张载玻片放桌上,推片以右手拇指和食指持其二侧,以左端下角从受检者之耳垂沾取血滴,在载玻片之适当位置, 自内向外回转扩大,涂成厚血膜,使厚薄均匀。涂毕后用干棉球拭掉推片上和耳垂上之残留小量血液。 薄血膜间日疟成熟裂殖体 卵形疟 雌配子体 间日疟 恶性疟 大于正常红细胞,圆形;核小,致密,深红色,偏于一侧,胞浆深蓝色;疟色素散在。 新月形,两端较尖;核小,致密,深红色,位于中央;胞浆深蓝色;疟色素围于核周。 雄配子体 间日疟 恶性疟 大于正常红细胞,圆形;核大,疏松,浅红色,多位于中央;胞浆浅蓝色或淡红色;疟色素散在。 腊肠形,两端钝圆,核大,疏松,淡红色,位于中央;胞浆浅蓝色或浅红色;疟色素位于核周。 薄血膜配子体 薄血膜配子体 恶性疟配子体 恶性疟配子体 恶性疟配子体 大配子体与大滋养体的形态区别 间日疟 2、厚血膜上疟原虫形态特征 2.1 环状体(R) 2.1.1间日疟环状体 2.1.2恶性疟环状体 2.2 滋养体(T) 2.2.1间日疟滋养体 2.2.2恶性疟滋养体 2.3 早期裂殖体(早S) 2.3.1间日疟裂殖体 2.3.2恶性疟裂殖体 2.4 晚期裂殖体 2.4.1间日疟晚期裂殖体 2.4.2恶性疟晚期裂殖体 厚血膜间日疟原虫形态 厚血膜间日疟原虫形态 厚血膜间日疟原虫形态 厚血膜间日疟原虫形态 厚血膜间日疟滋养体 间 日 疟 环 状 体 图注:本片上、下、左、右各有一个疟原虫。上、右、左均为大小不同的环状体;下为大滋养体,虫体已断裂成数块,但可见有薛氏点的红细胞残骸 间日疟 本片中部有两个白细胞,在其左上方、左下方各有一个大滋养体;其右上方有两个大滋养体,胞浆皆已绉缩成数块,但皆有红细胞残骸可见 间日疟 虫体位于本片中部,胞浆皱缩为多块,色素聚集于虫体右上方;本虫上方为一个大滋养体 滋养体 裂殖体 间日疟 厚血膜恶性疟环状体 厚血膜间日疟原虫形态 7个环状体散在于5个白细胞之间,每个虫体可见一个红色的核和蓝色断裂的或皱缩的原浆 恶性疟 2.5配子体(G) 2.5.1间日疟配子体 2.5.1.1 完整的配子体 2.5.1.2 浆裂断收缩,核与色素如常 2.5.1.3 浆已腐蚀消失,仅有核与色素 2.5
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