【金版学案】2015-2016人教版高中生物选修1课件 专题5 DNA和蛋白质技术 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段.pptVIP

专题5　DNA和蛋白质技术　　　　　　　　　　　　 　　　　　 课题2　多聚酶链式反应扩增 DNA片段 要点突破 一、生物体内的DNA复制与PCR反应的比较 ①DNA单链有方向性，DNA母链的3′端对应着子链的5′端，即DNA的两条链是反向平行的。 ②注意不同酶的作用：解旋酶的作用是使DNA两条链的氢键断开，而DNA聚合酶与DNA连接酶都是催化形成磷酸二酯键的。 ③DNA聚合酶是将单个核苷酸加到已有的单链片段的3′端上，需要模板，而DNA连接酶连接的是两条DNA片段的缺口，不需要模板。 例1 标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是(　　) A．92 ℃、50 ℃、72 ℃　　 B．72 ℃、50 ℃、92 ℃ C．50 ℃、92 ℃、72 ℃ D．80 ℃、50 ℃、72 ℃ 解析：当温度上升到90 ℃以上(90～96 ℃)时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到50 ℃左右(40～60 ℃)时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到72 ℃(70～75 ℃)时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。 答案：A ?变式训练 1．PCR技术中，引物的作