流式细胞仪原理及应用剖析.pptVIP

流式細胞儀 --- FACSCalibur之基本原理與應用 產品專員 劉益年 美商必帝公司 大綱 實驗設計原理 流式細胞儀運作原理 流式細胞儀之應用 Introduction of the experiment design for Flow Cytometry 藉由螢光抗體標識細胞之抗原特性 藉由螢光化合物標識細胞特性 藉由螢光染劑標識細胞特性 藉由螢光蛋白標識細胞特性 Cytometry Beads Array 單一細胞特性之偵測 單一細胞特性之偵測 Lysed Whole Blood Components Example 訊息傳導 BD? PhosFlow for Whole Blood or PBMC Samples 實驗設計原理 藉由螢光抗體標識細胞之抗原特性 藉由螢光化合物標識細胞特性 藉由螢光染劑標識細胞特性 藉由螢光蛋白標識細胞特性 Cytometry Beads Array Annexin V Assay Fas-induced Apoptosis in Jurkat Cells 實驗設計原理 藉由螢光抗體標識細胞之抗原特性 藉由螢光化合物標識細胞特性 藉由螢光染劑標識細胞特性 藉由螢光蛋白標識細胞特性 Cytometry Beads Array DNA 特異性染劑 細胞周期位相的決定 細胞增殖反應 細胞增殖反應 實驗設計原理 藉由螢光抗體標識細胞之抗原特性 藉由螢光化合物標識細胞特性 藉由螢光染劑標識細胞特性 藉由螢光蛋白標識細胞特性 Cytometry Beads Array GFP as a Reporter GFP as a Reporter The Usage of GFP 實驗設計原理 藉由螢光抗體標識細胞之抗原特性 藉由螢光化合物標識細胞特性 藉由螢光染劑標識細胞特性 藉由螢光蛋白標識細胞特性 Cytometry Beads Array Beads Provide a Flexible Platform Zap 70 Detection. Kinetic analysis of T cell activation by anti-CD3/CD28 Philadelphia chromosome The presence of this translocation is a highly sensitive test for CML, since 95% of people with CML have this abnormality Philadelphia chromosome 流式細胞儀 --- FACSCalibur運作原理 流式細胞儀的工作原理 流式細胞儀能測量 : 散射光 細胞大小 (前方散射光) 細胞折射率 (側方散射光) 各色螢光 綜合三個系統的功能: 液流系統:將細胞依序送到測量區受檢。 光學系統:產生並收集螢光、光散射等信號。 電子系統: 將光學訊號轉換成電子訊號。 分析所輸出的電流訊號，以脈衝高度、寬度、積分面積顯示。 量化訊號並傳至電腦。 FACS Calibur 的液流系統 FACS Calibur 儀表板 FACS Calibur 的工作原理 FACS Calibur 的光學系統 電子系統 將光學訊號轉換成正比例的電子訊號。 分析所輸出的電子訊號，以脈衝高度、寬度、積分面積顯示。 將量化訊號傳至電腦。 訊號之產生與處理 實驗數據的呈現 FACSCalibur-複習 流式細胞技術於醫事技術上之應用 臨床微生物檢測工具之研發 監測疾病病程與治療預後狀況 敗血症之研發 輸血醫學相關研究 抗藥性研究 感染症相關研究 免疫功能相關研究 凝血疾病相關研究 DNA分析與腫瘤診斷 定量分析工具之研發 血腫疾病研究 癌症相關研究 流式細胞技術於生物技術開發之應用 單珠抗體研發與螢光標識抗體之生產 癌症診斷試劑研發 老化研究〈細胞凋亡、自由基等〉 免疫功能與相關疾病診斷，治療與監控工具之開發 細胞生物學研究﹝細胞毒性，氧化代謝，訊息傳導等﹞ 商用檢測試劑組開發 新藥開發 造血幹細胞分化研究 遺傳探針之研發 病原特定性T細胞偵測工具之開發 細菌基因鑑定 轉染工具-報導基因之螢光蛋白 Apoptotic Phenotypes Apoptotic Phenotypes Annexin V Assay Annexin V is a Quick Assay Annexin V-PI Analysis ANALYSIS OF VIABLE APOPTOTIC CELLS Annexin V Assay: A Time Course APO-BRDU? Exploits the Large Number of DNA Fra