第二核酸的结构与功能剖析.pptVIP

概 述 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 2000年 美英等国完成人类基因组计划基本框架 组成核酸的戊糖有两种。 腺嘌呤Adenine 鸟嘌呤Guanine 尿嘧啶Uracil 胞嘧啶Cytosine 胸腺嘧啶Thymine 嘌呤碱和嘧啶碱含共轭双键 紫外区260 nm有强吸收 C-N糖苷键 多为5’-核苷酸 4.核苷酸的重要衍生物 （2）cAMP 和 cGMP 细胞信号传递的重要信使 2. DNA的二级结构 ①DNA碱基组成的特征-Chargaff规则 a)不同物种碱基组成不同； b)同一个体的不同器官和组织中的碱基组成相同； c)碱基组成不随年龄、营养状况、环境因素等变化; d)A=T，G=C 预示着A与T，G与C可能互补配对组成 ②1953年, Francis Crick and James Watson 提出DNA双螺旋结构模型 ①真核mRNA的3’-端有poly A尾； （与其半寿期有关） ②5’ -端有一个甲基化的鸟苷酸，称为帽结构。 （与翻译与mRNA的稳定有关） ③原核mRNA无帽子结构和poly A尾 ④真核mRNA含内含子和外显子，原核mRNA一般不含内含子 三. rRNA p38 (仅了解) 2. 核酸的水解 ①酸或碱水解 DNA和RNA对酸或碱的耐受程度有很大差别。 如在0.1 mol/L NaOH溶液中，RNA几乎完全水解， DNA则不受影响 ②核酸酶水解 DNA水解酶（DNases）、RNA水解酶（RNases）。 核酸外切酶和核酸内切酶。 限制性核酸内切酶：水解核酸中某些特定碱基顺序的部位。 二、 核酸的变性与复性 1. 变性：指核酸双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂，变成单链结构的过程。 核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂，一级结构(碱基顺序)保持不变。 变性核酸：OD260增高，粘度下降，浮力密度升高，失去其部分或全部的生物活性。 增色效应——核酸变性后，其在260 nm处的紫外吸收值将增加。 核酸变性的因素：温度升高、酸碱度改变、甲醛和尿素等的存在均可引起核酸的变性。 DNA的热变性 p27 DNA的变性过程是突变性的，在很窄的温度区间内完成。因此，通常将引起DNA变性的温度称为融点（解链温度、融解温度、Tm ）。 Tm：DNA热变性达到一半时候的温度。 G和C的含量高，Tm值高 2. 复性 ——变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构 DNA复性后，一系列性质将得到恢复，但是生物活性一般只能得到部分的恢复。 DNA复性的程度、速率与复性过程的条件有关。 将热变性的DNA骤然冷却至低温时，DNA不可能复性。但是将变性的DNA缓慢冷却时，可以复性。 分子量越大复性越难。浓度越大，复性越容易。此外，DNA的复性也与它本身的组成和结构有关。 3. 核酸的分子杂交 热变性的DNA单链与有互补序列的异源DNA单链形成双螺旋结构。这样形成的新分子称为杂交DNA分子。 DNA单链与互补的RNA链之间也可以发生杂交。 本章主要内容 DNA双螺旋结构的特点 与原核相比，真核生物mRNA的特点 tRNA的结构特点 核酸变性的因素、本质和理化性质特征 Tm DNA三级结构：超螺旋结构(supercoil) p22 双螺旋分子进一步螺旋化生成。 主要以盘旋方向与DNA双螺旋方向不同的负超螺旋形式存在。 原核生物DNA的高级结构 共价闭合双链环状 负超螺旋 DNA的高级结构：从核小体到染色体 p22-23 核小体结构特点： ①DNA双螺旋可进一步盘旋成紧密结构，并与组蛋白形成核小体； ②核小体是染色质的基本组成单位； ③核小体由组蛋白(H1，H2A，H2B，H3和H4)和DNA组成； ④ H2A，H2B，H3和H4各2分子，组成八聚体核心组蛋白； ⑤核心颗粒之间通过一段60 bpDNA和H1连成串珠结构 Nucleosome: 核小体 Octameric histone core： 八聚体核心组蛋白 （仅了解） DNA以核小体为基本单位包装成染色体： p23 ①DNA形成核小体，致密6倍； ②每6个核小体卷曲，形成30 nm纤维状结构，致密40倍； ③30 nm纤维进一步