代谢物的结构测定剖析.ppt

代谢物的分离和结构测定 体内药分第五专题 代谢物的分离和结构测定 药物代谢（drug metabolites） = 生物转化（biotransformation） 任何药物在体内都有其发挥疗效的时效期，因为大部分药物在体内都会被代谢而失去活性，代谢可以使脂溶性药物转变为水溶性化合物，从而加速药物从体内的排泄。 代谢物的分离和结构测定 代谢物的分离和结构测定 体内代谢的一般规律 制备代谢物的生物转化方法 代谢物的识别与结构鉴定 代谢物的分离和结构测定 肝脏代谢 肝外药物代谢 药物代谢酶的调节 影响药物代谢的因素 代谢物的分离和结构测定 代谢的一般规律： 一相代谢（phaseⅠ）或生物转化，它是指在药物的 分子上引入新的基团或除去原有的小基团的官能团反应； 生成可与二相反应的官能团：-OH,-COOH,-NH2,-SH等 二相代谢（phaseⅡ）或称结合反应，在这相反应 中，一些内源性小分子和药物或一相代谢产物结合，生成 的结合物极性增加，脂溶性降低，加速药物从体内的排泄。 代谢的一般规律： Ⅱ相代谢反应主要为结合反应，Ⅱ相代谢物是药 物排出体内的主要形式。 Ⅰ相代谢 Ⅰ相反应是药物在体内代谢转化的关键性步 骤，因为这一步反应常常是药物从体内消除的限 速步骤，它可以影响到药物的许多重要的药动学 特性，如药物的半衰期、清除率和生物利用度等。 肝脏代谢 微粒体酶系主要存在于肝细胞或其他（如小肠 黏膜、肾、肾上腺皮质细胞等）的内质网的亲脂 膜上。其中最重要的一族存在于肝脏中的氧化酶 被称为肝微粒体混合功能氧化酶系统或称单加氧 酶。 肝脏代谢 非微粒体酶在肝内和血浆、胎盘、肾、肠黏膜 及其他组织中均有存在，在体内除与葡萄糖醛酸结 合外的其他缩合，以及某些氧化、还原及水解(除酰 胺键外)反应均为该酶系所催化。通常凡是结构类似 于体内正常物质、脂溶性较小、水溶性较大的药物 都由这组酶系代谢。 1）细胞浆可溶部分的酶系。 2）线粒体中的酶系 3）血浆中酶系。 肝脏代谢 肝脏代谢 肝脏是药物的主要代谢部位，代谢也可发生在血浆，胃肠道，肾脏，肺等组织细胞中。 药物代谢反应是酶催化反应。代谢酶位于微粒体，内质网，胞液，溶酶体或核膜和胞浆膜中。肝脏是动物体内含代谢酶最丰富的部位。 肝脏代谢 Ⅰ相代谢 一相代谢主要包括的反应类型有氧化，还原和水解。 Ⅰ相代谢 P450依赖的混合功能氧化酶系 P450依赖的混合功能氧化酶系(MFO) 酶的分类 酶的结构 酶催化的代谢反应 P450依赖的混合功能氧化酶系 CYP后面跟一个数字，表示一个家族，然后是一个字母表示亚族的字母，最后的数字表示基因。 P450依赖的混合功能氧化酶系 P450依赖的混合功能氧化酶系 1.P450酶是一个多功能的酶系. 2.P450酶对底物的结构特异性不强. 3.P450酶存在有明显的种属、性别和年龄的差异. 4.P450酶具有多型性和多态性. 5.P450酶具有可诱导和可抑制性. P450依赖的混合功能氧化酶系 1.CYP450酶的aa一级序列变化多端，但是它们的空间折叠 结构在进化过程中始终保持不变，都包含特定的功能域。 2.所有CYP450酶中都具有血红蛋白结合位点。 3.CYP450酶是血红素-硫醇盐蛋白，最保守的区域与酶的 催化功能，和与血红蛋白结合有关。这个区域位于蛋白质 的核心. 4.超变区通常是aa的膜定位序列或底物识别位点，它的有 效的变化可以适应催化反应的进行。 5.在所有情况下，底物结构与CYP450核心对形成氢键连接 非常重要。 P450依赖的混合功能氧化酶系 P450依赖的混合功能氧化酶系 反应通式： 1.RH代表可氧化的药物底物，ROH代表羟化代谢物。 2.CYP450是一种耦合脂质盐。耦合状态下，CYP450发挥 水解酶的功能；去耦合状态下CYP450发挥高能氧化作用。 药物如果在微粒体脂质体的作用下改变了CYP450的耦合- 去耦合平衡，就会改变自身的代谢途径和代谢产物 P450依赖的混合功能氧化酶系 P450依赖的混合功能氧化酶系 药物在微粒体中氧化的示意图 P450依赖的混合功能氧化酶系 1.羟化反应 P450依赖的混合功能氧化酶系 P450依赖的混合功能氧化酶系 4.氧化脱氨基反应 5.脱卤素反应 P450依赖的混合功能氧化酶系 6.N-氧化反应 7.S-氧化反应 P450依赖的混合功能氧化酶系 M.F.O.系统催化的还原反应 P450依赖的混合功能氧化酶系 非微粒体混合功能氧化酶系催化的氧化反应 人体内许多与混合功能氧化酶系无关的酶也 能氧化药物，这些酶有醇脱氢酶、醛脱氢酶、 黄嘌呤氧化