westernblot详细图解.docxVIP

Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。 ?实验材料 HYPERLINK /product/%E8%9B%8B%E7%99%BD%E8%B4%A8%E6%A0%B7%E5%93%81 \t _blank 蛋白质样品 试剂、试剂盒 HYPERLINK /reagent/%E4%B8%99%E7%83%AF%E9%85%B0%E8%83%BA \t _blank 丙烯酰胺  HYPERLINK /reagent/SDS%C2%A0 \t _blank SDS?  HYPERLINK /reagent/Tris-HCl \t _blank Tris-HCl  HYPERLINK /reagent/%CE%B2-%E5%B7%AF%E5%9F%BA%E4%B9%99%E9%86%87 \t _blank β-巯基乙醇  HYPERLINK /reagent/ddH2O \t _blank ddH2O  HYPERLINK /reagent/%E7%94%98%E6%B0%A8%E9%85%B8 \t _blank 甘氨酸  HYPERLINK /reagent/Tris \t _blank Tris  HYPERLINK /reagent/%E7%94%B2%E9%86%87 \t _blank 甲醇  HYPERLINK /reagent/PBS \t _blank PBS  HYPERLINK /reagent/NaCl \t _blank NaCl  HYPERLINK /reagent/KCl \t _blank KCl  HYPERLINK /reagent/Na2HPO4 \t _blank Na2HPO4  HYPERLINK /reagent/KH2PO4 \t _blank KH2PO4  HYPERLINK /reagent/ddH2O \t _blank ddH2O  HYPERLINK /reagent/%E8%80%83%E9%A9%AC%E6%96%AF%E4%BA%AE%E5%85%B0 \t _blank 考马斯亮兰  HYPERLINK /reagent/%E4%B9%99%E9%85%B8 \t _blank 乙酸  HYPERLINK /reagent/%E8%84%B1%E8%84%82%E5%A5%B6%E7%B2%89 \t _blank 脱脂奶粉  HYPERLINK /reagent/%E7%A1%AB%E9%85%B8%E9%95%8D%E8%83%BA \t _blank 硫酸镍胺  HYPERLINK /reagent/H2O2 \t _blank H2O2  HYPERLINK /reagent/DAB%E8%AF%95%E5%89%82%E7%9B%92 \t _blank DAB试剂盒 仪器、耗材 HYPERLINK /equipment/%E7%94%B5%E6%B3%B3%E4%BB%AA \t _blank 电泳仪  HYPERLINK /equipment/%E7%94%B5%E6%B3%B3%E6%A7%BD \t _blank 电泳槽  HYPERLINK /equipment/%E7%A6%BB%E5%BF%83%E6%9C%BA \t _blank 离心机  HYPERLINK /equipment/%E7%A6%BB%E5%BF%83%E7%AE%A1 \t _blank 离心管  HYPERLINK /equipment/%E7%A1%9D%E9%85%B8%E7%BA%A4%E7%BB%B4%E7%B4%A0%E8%86%9C \t _blank 硝酸纤维素膜  HYPERLINK /equipment/%E5%8C%8