Wnt信号通路调控机理剖析.pptVIP

Wnt信号通路的调控机理 contents Wnt基因及其蛋白 Wnt三条信号通路 Wnt/PCP通路 Wnt/钙离子通路 经典Wnt通路及其调控 Wnt基因及其蛋白 Wnt蛋白 属于分泌型糖蛋白, 它们通过旁分泌或自分泌作用与位于细胞膜上的受体相结合, 激活胞内的各级信号传导分子, 调节靶基因的表达。 通过结合到细胞膜上的受体引发下游一系列信号转导，其自身存在一个产生-修饰-分泌-转运的过程。 Wnt蛋白 修饰主要有两种:糖基化和棕榈酰化 属于一类高度不溶的蛋白，这主要是因为其脂质化修饰。 Wnt基因及其蛋白 Wnt三条信号通路 经典Wnt通路(Wnt/β-catenin通路) Wnt/PCP通路( planar cell polarity pathway) Wnt/钙离子(Wnt/Ca2+)通路 Wnt/PCP通路 Wnt/PCP通路主要通过激活Dsh下游区、Rac、小GTP酶、Rho和Cde42等, 从而激活c-junN端激酶JNK来发挥作用。 参与细胞极性的建立和细胞骨架重排, 调节细胞骨架的不对称分布和上皮细胞的协同极化； Wnt/钙离子(Wnt/Ca2+)通路 Wnt/钙离子主要由wnt5a和wnt11激活, 可能通过G蛋白激活PLC( PhospholipaseC)和PKC( ProteinkinaseC), 从而引起细胞内Ca2+浓度增加和Ca2+敏感信号成分的激活, 以调节细胞运动和细胞粘着性。 该通路能拮抗经典的Wnt通路 经典Wnt通路,该通路激活后导致细胞质内β-catenin的稳定和积累, 然后β-catenin进入细胞核内激活靶基因表达； WNT信号通路由以下部分组成：细胞外的WNT配体蛋白、细胞膜上的受体、细胞浆内的信号传导部分和核内的转录调控部分。 经典Wnt通路及其调控 经典Wnt通路调控机理 胞浆内的调控 核内的调控 Wnt下游基因的反馈调控 胞浆内的调控 经典的Wnt信号通路中，对β-catenin浓度的调控处于中心地位。βcatenin的浓度受Axin/GSK-3/APC复合体控制 Axin/GSK-3/APC复合体：Axin蛋白结合GSK3、CK1、β-catenin形成 β-catenin蛋白三个功能区域 N端 可以结合辅因子Bc19. 中段和C端：由12个Armadillo重复区段（R1~R12）组成 R3~R10区域介导了β-catenin与TCF的结合，此区域的缺失会使β-catenin对下游基因的激活作用完全丧失。 C端区域为转录激活区域，可以结合一系列通用转录辅因子如染色质重塑因子，组蛋白乙酰转移酶，促进转录的起始和延伸。 胞浆内的调控 当无Wnt/Wg配体存在时，胞质中的Axin复合体处于稳定状态。 蛋白磷酸酶PP1和PP2A与Axin、APC结合，分别对Axin、β-catenin去磷酸化，抑制复合物的形成和β-catenin的降解。 APC可以抑制PP2A对β-catenin的去磷酸化作用，同时促进β-catenin与Axin的结合。 胞浆内的调控 没有wnt信号分子存在时β-catenin被APC复合体中的CK1和GSK3β磷酸化后进入蛋白酶体降解途径 胞浆内的调控 Wnt/Wg信号存在时，Axin/GSK-3/APC复合体解聚，细胞浆内的β-catenin/Armadillo得以稳定并不断积累，进入细胞核与TCF结合，启动下游基因转录。 胞浆内的调控 Wnt受体由Fz和LRP5/6组成。 Wnt蛋白与受体的结合引起LRP5/6的磷酸化和Fz-LRP5/6复合体的形成。Dsh可以与Fz结合，LRP5/6含有5个连续的PPPSPXS区域， Axin可以与磷酸化的PPPSPXS结合，同时Axin结合GSK3、CK1,引起GSK3、CK1对其余PPPSPXS区域的磷酸化，PPPSPXS的磷酸化又进一步促进Axin的结合。 Dsh和Axin都含有一个DIX结构域，二者可以通过这一区域形成Dsh-Dsh或Dsh-Axin多聚体，促进Wnt-Fz-LRP5/6复合物的形成。 Axin蛋白与LRP5/6的结合导致了Axin复合物的解体，从而促进β-catenin的稳定性 核内的调控 在没有β-catenin的状态下，TCF与Croucho、CtBp、Coop等抑制性因子结合，招募HDAC，下游基因的转录被抑制 核内的调控 β-catenin可以替换Groucho和Coop与TCF结合，激活下游基因转录，其N端通过Bc19-Pygo与MEG12、MED13、TAF4、H3K3me2结合，C端与多种转录辅助因子结合，如乙酰转移酶CBP，甲基转移酶MLL，染色质重塑因子BRG1，转录起始和延伸辅助因子MED12、PAF1等 核内的调控 β-