选修三基因工程的基本工具.pptVIP

* 愿同学们在新的一年里，健康快乐像马猴，无忧无虑比猿猴，聪明伶俐胜孙猴！好事多如猴毛，成绩猴顺猴顺滴！！ 选修3 生态工程 生物技术的安全性 和伦理问题 胚胎工程 细胞工程 基因工程 现代生物科技 专题 专题1.基因工程 基因工程的概念 1.1 基因工程的基本工具 1.2 基因工程的基本操作程序 基因工程的发展史 1.3 基因工程的应用 1.4 蛋白质工程的崛起 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。 基因工程名称 基因拼接技术或DNA重组技术 实质:基因重组 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 “剪切”“拼接”“导入”“表达” 结果 人类需要的基因产物 基因工程的概念 这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 为什么能把一种生物的基因“嫁接”到另一种生物上并成功表达？ 即：（1）不同生物DNA分子的基本结构是相同的，都遵循碱基互补配对原则。 （2）生物界共用一套遗传密码。 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三： 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 基因的剪刀——限制酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 分 布： 主要从原核生物中分离纯化得到 作用特点： 特异性，即识别双链DNA分子的 特定核苷酸序列，切割特定切点 切 点： 每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 种 类： 约4000种 举 例： EcoRI限制酶能识别GAATTC序列， 并在G和A之间切开 结 果： 形成两种末端 黏性末端 平末端 限制酶所识别的序列有什么特点 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 限制性内切酶 限制酶 1.什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 2.什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 限制酶的识别序列： 中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的 要想获得目的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？ 要切两个切口，产生四个黏性(平)末端。 要把目的基因插入运载体的前提是什么 必须用同一种限制酶来切割目的基因和运载体。 思考? CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 3.限制酶在原核生物中的作用 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 含