第4章 生物信息的传递 下.ppt

* * * * * 白喉毒素(diphtheria toxin)的作用机理 干扰素的作用机理 蛋白质合成后经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位的过程称为蛋白质的靶向输送。 蛋白质的靶向输送(protein targeting) 蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质的定位信息存在于该蛋白质自身结构中，并且通过与膜上特异受体相互作用得以表达。信号序列与核糖体结合合成后与膜上受体相互作用，产生特殊通道，允许多肽在合成的同时穿过膜结构，这种方式是边翻译边跨膜转运。 SRP（信号识别蛋白）----信号肽----多核糖体复合物----DP（SRP受体）。 （一）、翻译-转运同步机制 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要是N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这类序列称为信号序列(signal sequence)。 信号序列是决定蛋白质靶向输送特性的最重要元件，提示指导蛋白质靶向输送的信息存在于蛋白质自身的一级结构中。 靶向输送的蛋白质N-端存在信号序列 N-端含1个或几个带正电荷的碱性氨基酸残基，如赖氨酸、精氨酸； 中段为疏水核心区，主要含疏水的中性氨基酸，如亮氨酸、异亮氨酸等； C-端加工区由一些极性相对较大、侧链较短的氨基酸（如甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸）组成，紧接着是被信号肽酶(signal peptidase)裂解的位点 。 信号肽有以下共性： 信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 Blobel with members of his laboratory Günter Blobel Blobel等（1975）提出信号假说，认为蛋白质N端的信号肽，指导蛋白质转至内质网上合成，获1999年诺贝尔生理医学奖。 翻译后转运机制 真核细胞分泌型蛋白质的靶向输送过程为：核蛋白体上合成的肽链先由信号肽引导进入内质网腔并被折叠成为具有一定功能构象的蛋白质，在高尔基复合体中被包装进分泌小泡，转移至细胞膜，再分泌到细胞外。 （二）分泌型蛋白质由分泌小泡靶向输送至胞外 （三）蛋白质6-磷酸甘露糖基化是靶向输送至溶酶体的信号 与分泌型蛋白质一样，内质网中的驻留蛋白质先经粗面内质网上的附着核蛋白体合成并进入内质网腔，然后随囊泡输送到高尔基复合体。但是，内质网蛋白质多肽链的C-端含有滞留信号序列，可与相应受体结合。在高尔基复合体上，内质网蛋白质通过其滞留信号序列与受体结合后，随囊泡输送回内质网。 （四）靶向输送至内质网的蛋白质C-端含有滞留信号序列 质膜蛋白质合成时在粗面内质网上的跨膜机制与分泌型蛋白质的跨膜机制相似，但是，质膜蛋白质的肽链并不完全进入内质网腔，而是锚定在内质网膜上。 不同类型的跨膜蛋白质以不同的形式锚定于膜上。 （五）质膜蛋白质的靶向输送由囊泡转移到细胞膜 （六）线粒体蛋白质以其前体形式在胞液合成后靶向输入线粒体 线粒体含1000多种蛋白，绝大多数由核基因编码，在细胞质中合成，定向转运至线粒体。 前体蛋白在运输前，以未折叠形式存在，N端的一段信号序列称为导肽或引肽（leader peptide），完成转运后被酶切除，成为成熟蛋白，这种现象称后转译。 蛋白质的转运涉及转位因子。 TOM复合体：通过外膜，进入膜间隙。 TIM复合体：进入基质(TIM23)或内膜(TIM22)。 线粒体内外膜之间存在接触点，蛋白通过此处的TOM和TIM复合体，一步进入基质。 蛋白质的输入是一个耗能过程： 在线粒体外解除与前体蛋白质结合的分子伴侣，需要通过水解ATP获得能量。 在通过TIM复合体时利用质子动力势作为动力。 前体蛋白进入线粒体基质后，线粒体hsc70依次结合在蛋白质线性分子上，将蛋白质“铰进”基质，需要消耗ATP，然后hsc70将蛋白质交给hsp60，完成折叠。 真核细胞线粒体蛋白质的靶向输送 叶绿体蛋白转运与线粒体的相似，都发生后转译； 每一种膜上有特定的转位因子； 内外膜具有接触点； 需要能量，利用ATP和质子动力势； 前体蛋白N端有信号序列，使用后被信号肽酶切除。 （七）叶绿体的蛋白质转运 叶绿体蛋白跨膜转运的机制 胞质 基质 （八）细胞核蛋白质在胞液中合成后经核孔靶向输送入核 靶向输送到细胞核的蛋白质其多肽链内含有特异信号序列，称为核定位序列(nuclear localization sequence, NLS) 。 NLS为含4～8个氨基酸残基的短序列，富含带正电荷的赖氨酸、精氨酸和脯氨酸，可位于肽链的不同部位，而不只在N末端。 不同的NLS间未发现共有序列； 在蛋白质进核定位后，NLS不被切除。 核定位序列 蛋白质降解 生物体中蛋白质的存在是一个动态的过程 蛋白质的降解是一个有序的过程 泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin-proteasome system，UPS）