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选修三 现代生物科技专题
第1讲 基因工程及其安全性(含生物武器)
(1)基因工程的诞生(Ⅰ) (2)基因工程的原理及技术(Ⅱ) (3)基因工程的应用(Ⅱ) (4)蛋白质工程(Ⅰ) (5)转基因生物的安全性(Ⅰ) (6)生物武器对人类的威胁(Ⅰ) 实验:DNA的粗提取与鉴定
一、基因工程的概念及基本工具
1.概念
(1)操作环境:体外
(2)操作水平:分子(DNA)水平,又叫①________
(3)原理:②________
(4)优点:定向改造生物性状
2.基因工程的基本工具
(1)限制
性核
酸内
切酶
(2)DNA连接酶
常用类型 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 来源 ⑦________ T4噬菌体 功能 连接黏性末端 连接⑧________ 结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 (3)载体
①常用载体
——质粒
②其他载体:λ噬菌体衍生物、________等。
二、基因工程的基本操作程序
1.目的基因的获取
(1)目的基因:编码蛋白质的基因。
(2)获取方法:从基因文库中获取、利用________扩增目的基因、利用________人工合成。
2.基因表达载体的构建——基因工程的核心
(1)目的:使目的基因在受体细胞中____________,并可以遗传给下一代;使目的基因能够____________和发挥作用。
(2)基因表达载体的组成:目的基因、________、终止子和标记基因等,如图。
①与载体相比较,增加启动子、目的基因和终止子三个基因片段,其功能各不相同。
②启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。
3.将目的基因导入受体细胞
导入植物细胞:________________、基因枪法、花粉管通道法
导入动物细胞:____________
导入微生物的方法:先用________处理再融合
4.目的基因的检测和鉴定
(1)检测:分子水平。
检测是否有目的基因:分子杂交技术
(________+转基因生物________)
检测是否转录:分子杂交技术
(DNA探针+转基因生物________)
检测是否翻译:________
(2)鉴定:个体水平。
三、基因工程的应用
技术名称 应用 植物基因
工程 培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和________转基因植物,利用转基因改良植物的品质 动物基因
工程 提高动物生长速度,改善畜产品的品质,用转基因动物生产药物,用转基因动物作________的供体 基因治疗 把________导入病人体内,使其表达产物发挥作用,从而治疗疾病,分为体内基因治疗和体外基因治疗 四、蛋白质工程
1.崛起缘由
天然蛋白质________人类生产和生活的需要。
2.目标
根据人们对蛋白质功能的特定需求,对________进行分子设计。
3.操作手段
基因修饰或基因合成。
4.设计流程
预期蛋白质功能―→设计预期蛋白质结构―→推测应有的________序列―→找到对应的________序列(基因)。五.DNA粗提取的原理方法步骤
提取方法 提取原理 步骤 盐析法 (1)在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;(2)不溶于酒精,但某些化合物溶于酒精 (1)溶解在 ________的NaCl溶液中;
(2)NaCl溶液加水稀释至________,使DNA析出、过滤;
(3)加入________析出 自我校对:
①DNA重组技术 ②基因重组 ③原核生物 ④磷酸二酯键 ⑤特定的脱氧核苷酸序列 ⑥黏性末端 ⑦大肠杆菌 ⑧黏性末端或平末端 ⑨限制酶 遗传标记基因 动植物病毒 PCR技术 DNA合成仪 稳定存在 表达 启动子 农杆菌转化法 显微注射法 Ca2+ DNA探针 DNA mRNA 抗原—抗体杂交 抗逆 器官移植 正常基因 不一定完全符合 蛋白质的结构 氨基酸 脱氧核苷酸2 mol/L 0.14 mol/L 冷酒精
基因工程的理论基础与操作工具
1.基因工程的基本原理和理论基础概括(如下图)
2.与DNA分子相关的酶
(1)几种酶的比较
比较项目 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脱氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 碱基对间的氢键 作用结果 形成黏性末端或平末端 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成单链DNA分子 (2)限制酶与DNA连接酶的关系
①限制酶不切割自身DNA的原因是:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
②DNA连接酶起作用时不需要模板。
3.载体
(1)作用
①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。
②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。
(2)具备的条件
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