natmethods全面单细胞测序技术剖析.ppt

2013年，单细胞测序技术（single-cellsequencing）荣膺《自然-方法》年度技术。本文将介绍2013年单细胞测序技术在人类早期发育、癌症以及神 经科学研究等几个重点领域的最新应用成果。2013年，单细胞测序技术开始成为科研界主流关注的焦点1.单细胞测序技术简介本节将概述如何获得一个单细胞的基 因组及转录组。单细胞基因组及转录组测序所需要的测序样本量要比单细胞中本身所含有的基因组及转录组分子高出好多个数量级，所以这对核酸扩增技术（amplifica tiontechnology）也是一大考验。面对如此微量的分子，任何降解、样品损失、或者污染都会对测序质量带来非常严重的影响。而且多重扩增又容易带来试验误差，比 如基因组或转录组覆盖不均一、背景噪声以及定量不准确等问题。最近所取得的技术进步有望部分解决上述问题，使单细胞测序技术能够走进更多的实验室，解决更多领域的科学 问题。比较罕见的细胞、异质性的样本、与遗传嵌合或突变相关的表型、不能人工培养的微生物，这些都是单细胞测序技术能够一展所长的研究平台。使用单细胞测序技术能够发现克 隆突变（clonalmutation）、隐藏的细胞类型，或者在大块组织样品研究工作中被“稀释”或平均掉的转录特征。1.1选择恰当的细胞说到分离单细胞，显 微操作（micromanipulation）无疑是一项非常精确的技术，而且利用毛