第八章遗传详解.pptVIP

第四节 微生物的突变 一、突变率和基因符号 突变率: 某一细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率。 基因符号: 二、突变的类型 （一）基因突变 （二）染色体畸变 突变株表型：营养缺陷型、抗性突变型、 条件致死突变型、形态突变型、 抗原突变型、产量突变型 三、自发突变、诱发突变 S型菌落 R型菌落 （一）基因突变的自发性和突变结果育原因不对称性的试验 1、变量试验 1943年 S.E.Luria等设计。试验证明抗噬菌体突变与是否接触噬菌体无关，突变发生越早抗性菌落越多。 2、涂布试验 1949年 H.B.Newcombe 3、平板影印培养试验 1952年J.Lederberg利用E.coli K12证明抗药性 突变与接触药物无关。 变量试验(fluctuation test) 涂布试验 5h 涂布 喷噬菌体 353 5h 12皿 喷噬菌体 28 影印试验(replica plating) （二）自发突变 自发突变： 10-9－ 10-6 1、自发突变原因 1）DNA复制 2）背景辐射和环境因素的诱变 3）微生物自身有害代谢物的诱变 4）突变热点 甲基化胞嘧啶、互变异构效应 2、定向育种 卡介苗，用牛结核分枝杆菌历经13年，230代转接得到。 （三）诱发突变 诱变剂： 1、物理因素的诱变：uv、x-射线、 x-射线 x-射线：形成嘧啶二聚体和水合物 a、光复活作用 b、暗修复（切除修复） 2、化学因素的诱变 碱基的置换 转换：A G；T C 颠换：A T； G C （1）碱基结构类似物 5-溴尿嘧啶是T的类似物，它渗入DNA分子的复制中，导致突变的发生。 5-溴尿嘧啶（5-Buk）/（5-Bue） 复制中 5-Buk 与A配对 5-Bue与G配对 A：T G：C （2）直接引起置换的诱变剂 直接与碱基发生化学反应 亚硝酸使碱基脱氨，脱去的氨基被羟基 取代；使A H（次黄嘌呤） G X（黄嘌呤） C U（尿嘧啶） 复制时配对 H:C；X:G；U:A A:T G:C （3）移码突变 （4）染色体畸变 缺失、重复、倒位、易位 3、定位诱变 第五节 微生物遗传变异的应用 一、诱变育种 1、一般性原则 （1）挑选优良的出发菌株 具有利性状：高产、生产快速、培养粗放 对诱变剂敏感 （2）选择敏感时期和合适对象 （3）简便有效的诱变剂 以获得正突变为目的（提高产量）。 诱变剂多为“三致剂”（致突变、致畸、致癌） （4）选用最适剂量 （5）初筛 利用和创造形态、生理与产量间的相关指标 （6）复筛 （二）营养缺陷型突变株的筛选 1、营养缺陷型 （1）培养基 基本培养基（MM） 完全培养基（CM） 补充培养基（SM） （2）遗传型 野生型（A+B+） 营养缺陷型（A-B+、A+B-） 原养型（A+B+） 2、筛选过程 （1）中间培养 （2）淘汰野生型： 抗生素法：青霉素法 菌丝过滤法： （3）捡出缺陷型： 点种法、夹层培养法、 限量补充培养法、影印平板法 （4）鉴定缺陷型 二、原生质体融合育种 用人为的方法使遗传性状不同的两个细胞的原生质体融和，获得遗传性状重组子的过程。 （一）原生质体融合及其意义 （二）原生质体融合技术及育种步骤： 1、原生质体的制备 将两种不同的细菌经溶菌酶或青霉素、蜗牛酶等处理，失去细胞壁成为原生质体的过程。 2、原生质体融和 在促融剂聚乙二醇作用下促使二种原生质体的融合。 3、细胞壁再生 4、融和子捡出与鉴定 第七节 基因工程和合成生物学 一、基因工程 用人工方法，通过体外基因重组和载体的作用，使新构建的遗传物质组合进入新个体，并稳定遗传、表达的过程。 （一）基因分离与克隆 1、目的基因的获得 2、基因分离 3、基因克隆 （二）