武汉茶学科报告介绍.pptVIP

茶多酚调节代谢免疫机理研究进展 ——茶多酚作用新靶点的发现与机理研究 云南农业大学 盛 军 YNAU云南农业大学 YNAU 2003年发现EGCG作用细胞膜表面靶点 EGCG有8个羟基，不能自由通过细胞膜 67KDLaminin Receptor(67LR) （Nature /Structure Molecular Biology, 2003） EGCG介导炎症调节反应，抑制肿瘤血管生成，抑制肿瘤的增殖和转移 YNAU云南农业大学 YNAU EGCG 与EGCG发生相互作用的分子 Lipid raft(LR) 细胞膜 所有细胞 LamR 细胞膜、LR HepG2, Hela, MCF-7.,A375SM FAS 细胞膜、LR LNCaP,Jurkat EGFR/HER2 细胞膜、LR CaP.BrC.CC HGFR/Met 细胞膜、LR 乳腺癌 DHFR LR 人、牛 NF?B 细胞膜、LR CC IGF1 细胞膜、LR VEGF-R1/R2 LR BAEC,HMEC-1,BCLL MMP-9 LR BrC,CaP uPAR LR BrC,CaP,Glioma YNAU云南农业大学 YNAU 与EGCG发生相互作用的分子 Proteasome subunit p38 LR Ubiquitin-activating enzyme E1 LR DNA 细胞核 RNA 细胞核 AP-1 细胞核 DNMT1/2/3 细胞核 BrC,Cell-free Topoisomerase II 细胞核 Human and CHO Clusterin/apolipoprotein J 细胞核 CaP,CC Telomerase 细胞核 Lung cancer, BrC YNAU云南农业大学 YNAU EGCG抑制炎症机理研究 人单核细胞系THP-1分化形成巨噬细胞 LPS激发巨噬细胞炎症反应 YAMADA(MLuC5株sc-59732 ) 使用的67LR抗体封闭EGCG的作用 YNAU云南农业大学 YNAU 炎症与疾病 糖尿病患者炎症因子是正常人4－6倍 肥胖人炎症因子是正常人3－5倍 骨质疏松症患者炎症因子是正常人6倍 慢性炎症是肿瘤、癌症发生的重要原因 YNAU云南农业大学 YNAU YNAU云南农业大学 YNAU “上火”—炎症 EGCG 具有抑制炎症因子的效应 YNAU云南农业大学 YNAU IL-1β β-actin (-)0.5h LPS-0.5h LPS+EGCG-1h EGCG-1h LPS-1h EGCG-1.5h LPS-1.5h LPS+EGCG-1.5h EGCG对LPS诱导的IL-1b的抑制作用 YNAU云南农业大学 YNAU 封闭67LR不影响EGCG抑制炎症的效应 YNAU云南农业大学 YNAU Notch-1 β-actin β-actin Notch-2 Notch-4 β-actin （—） EGCG anti-67LR EGCG+anti-67LR EGCG作用NOTCH不依赖于67LR YNAU云南农业大学 YNAU EGCG作用NOTCH具有浓度依赖性 (-) 50 1.5625 3.125 6.25 12.5 25 Notch-1 β-actin (mg) YNAU云南农业大学 YNAU NOTCH: YNAU云南农业大学 YNAU Notch hetelodimer Jegged TACE 在多细胞生物的发育中, 需要通过邻近细胞间的相互作用对各谱系细胞分化潜能进行精确的调控。在果蝇发育的研究中，发现了一条在多种细胞的特化中起关键作用的传导细胞间相互作用信号的途径, 称为notch信号途径,该途径在多种动物体内进化过程中高度保守，主要介导细胞的分化抑制,在胚胎发育、血细胞发育、肿瘤形成、炎症等生理病理过程中起重要作用。 g-secretase (-) LPS EGCG LPS LPS+E EGCG LPS LPS+E 0.5h 1h 1.5h EGCG抑制Notch信号与NF-kB磷酸化无关 YNAU云南农业大学 YNAU EGCG调节膜受体蛋白Notch泛素化加速降解 (-)0.5h LPS-0.5h LPS+EGCG-1h EGCG-1h LPS-1h EGCG-1.5h LPS-1.5h LPS+EGCG-1.5h 泛素化notch 活化型notch notch前体 YNAU云南农业大学 YNAU EGCG抑制Notch靶基因的表达 YNAU云南农业大学 YNAU RNA干扰试验： 降低Noth1