DNA的生物合成甲摘要.pptVIP

2）5?- 3? 外切酶活性 大肠杆菌（E.coli)中的三种DNA聚合酶 The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2009 在高等真核生物，端粒酶只在胚胎细胞中有活性，而成年组织细胞中没有活性或活性极低。 在高等真核生物，端粒酶只在胚胎细胞中有活性，而成年组织细胞中没有活性或活性极低。 大约90%的肿瘤类型发现有端粒酶活性。 端粒酶与细胞的永生性（immortalization）及肿瘤发生（tumorogenesis）都密切相关。 2008年诺贝尔生理学奖 3? 5? 3? 5? 引物是由引物酶催化合成的短链RNA分子。 引物 3 HO 5 引物酶 二、DNA链的延长 复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 5 3 5 dATP dGTP dTTP dCTP dTTP dGTP dATP dCTP OH 3 3 DNA-pol 在复制叉同时合成前导链和后随链 5? 5? 5? RNA酶 OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 三、复制的终止 切除引物 填补空缺 连接切口 原核生物基因是环状DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。 ori ter E.coli 82 32 ori ter SV40 50 0 复制过程简图 引物酶 冈崎片段1-2kbp 拓扑异构酶 哺乳动物的细胞周期 DNA合成期 G1 G2 S M 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。 第四节 真核生物DNA生物合成过程 The Process of DNA Biosynthesis in eukaryotes 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 复制的起始需要DNA-pol α（引物酶活性）和pol δ（解螺旋酶活性）参与。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。 增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen, PCNA)在复制起始和延长中起关键作用。 一、真核生物复制的起始与原核基本相似 3? 5? 5? 3? 领头链 3? 5? 3? 5? 亲代DNA 后随链 引物 核小体 三、真核生物DNA合成后立即组装成核小体 二、真核生物复制的延长发生DNA聚合酶α/δ转换 5? 3? 3? 5? 5? 3? 3? 5? + 5? 3? 3? 3? 3? 5? 5? 四、端粒酶参与解决染色体末端复制问题 染色体是如何被端粒和端粒酶保护的。 四膜虫 / 端粒(telomere)： 真核生物染色体线性DNA末端结构，由末端单链DNA序列和蛋白质构成。 由富含TG的重复序列组成；人的端粒重复序列为5’-(TnGn)x-3?。 /archives/21095.html “末端”（telos）+“部分”（meros）=“端粒”（telomere） 端粒酶(telomerase) 端粒酶RNA (human telomerase RNA, hTR) 端粒酶协同蛋白(human telomerase associated protein 1, hTP1) 端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTRT) 组成： 端粒酶合成端粒的爬行模型（inchworm model） DNA聚合酶复制子链 进一步加工 端粒酶的特点： 伊恩·维尔穆特博士和多利 参与DNA复制的物质: 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP； 聚合酶(polymerase): 依赖DNA的DNA聚合酶，简写为 DNA-pol； 模板(template): 解开成单链的DNA母链； 引物(primer): 提供3?-OH末端使dNTP可以依次聚合； 其他的酶和蛋白质因子：解链、稳定、连接。 一、DNA聚合酶催化脱氧核苷酸间的聚合 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol 活性： 1. 5??3? 的聚合活性 2. 核酸外切酶活性 指能从核酸链的末端把核苷酸依次水解出来的作用，外切酶的作用是有方向性的。 1）3? -5?外切酶活性 功能：即时校读，切除错配并正确配对 错配碱基 功能：切除引物、突变的碱基。 （一）原核生物有3种DNA聚合