分子生物学7预案.pptVIP

* * * * * * * L—19的 polyC 聚合酶活性进一步表明 L—19 具有酶的 主要特征： 专一性强 加快反应速度 反应前后酶分子保持不变 人们称这种由RNA构成的酶为---- 核糖核酸质酶（ribozyme） 可简称 R酶 Ⅱ类内含子的剪接 1、剪接点序列 7核苷酸的保守序列 （Branch Site ） 3’ 剪接点上游 6bp ~ 12bp 处 ● 5’----exon----- GUGCG---------B.S----Py AU ----exon---3’ 供点 受点 ----Py Pu Py Py U A Py--- 100% ● 在Branch Site 的两侧存在一些短的序列， 与其上游10-50Nt处互成 IR,形成茎环结构(但A 不包含在 IR序列内, 从而被排除成芽状突起） 5’--GUGCG--------------------PyPuPyPyUAPy-----PyAU—3’ Intron IR IR 5’ G AU 3’ A 2 具体机制 第II类内含子自我剪接是借助于内部的一个腺苷酸催化的 套索中的2ˊ,5ˊ-磷酸二酯键位于称之分支点的部位，这个部位形成了一个带有3个磷酸二酯键的结构 核基因mRNA内含子的剪接 1、相关概念 Euk.的细胞中，有许多碱基数在100 ~ 300之间 的小分子RNA，每个细胞有 105~106个 snRNA+ 细胞核中的 （snRNP）核蛋白 核内小核糖核蛋白（small nuclear nucleoproteins，snRNP ） scRNA： 细胞质中的 （scRNP） 质蛋白 2、核mRNA内含子剪接的结构特点 内含子剪接与其他加工同时进行 剪接点序列 Breathnach-Chambon rule （GU－AG规则） ● 5’---exon--- GU--------intron--------AG ------exon----3’ 供点 100% 94% 受点 ● 7Nt branch site 3’剪接点的上游 py X py U pu A py 3、机制（Splicing mehanism ) ● SnRNA (or ScRNA) 与剪接点序列间存在互补区域 并参与剪接, 形成剪接体( spliceosome)。 ● Spliceosome 逐级组装， SnRNA（U1、U2、U5和 U4／U6）分步替代 ● U1通过与 5’剪接点互补而结合 U2识别并结合分支 点A U1和U2作用使内含子的 5’端和 3’端带到 一起（U1与 3’剪接点配对） U1、U2、mRNA与 U4－U5－U6复合物形成一个完整的剪接体 ● 第一次转酯－－左外显子、内含子剪切套索 ● 第二次转酯－－exons连接、套索状内含子释放 ● 剪接体（spliceosome） 解体与lariat降解同步 Alternative Splicing Patterns Alternative splicing of the same pre-mRNA gives rise to very different products Alternati