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第六章 微生物的遗传变异与菌种选育 几个基本概念 遗传型(genotype): 又称基因型,指某一生物个体所含有的全部遗传因子即基因的总和。 表现型(phenotype): 指某一生物所具有的一切外表特征及内在特性的总和,是遗传型在合适条件下的具体体现。 几个基本概念 变异(variation):指生物体在某种外因或内因作用下引起的遗传物质结构或数量的改变,亦即遗传型的改变。 饰变(modification): 指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。 遗传(heredity或inheritance)和变异(variation)是生物体最本质的属性之一。 在遗传性适宜的环境条件下时,通过代谢和发育才能使其后代转化为与亲代相同的具体性状。 第一节 微生物遗传变异的物质基础 一、证明核酸是遗传变异物质基础的经典实验 肺炎双球菌的转化实验 噬菌体的感染实验 烟草花叶病毒的拆开与重组实验 这些实验说明: 加热杀死的S型细菌,在其细胞内可能存在一种转化物质, 这种转化物质能通过某种方式进入R型细胞,并使得R型细胞获得稳定的遗传性状。 以上结果表明 只有S型菌株的DNA才能将S.pmeumoniae 的R型转化成S型。 DNA纯度越高,转化效率也越高。 转移的是以DNA为物质基础的遗传因子,而不是遗传性状本身(荚膜多糖)。 (二)噬菌体的感染实验 1952 年,侯喜(A. Hershey)和蔡斯(M. Chase)发表了证明DNA是噬菌体的遗传物质的实验: 先用含有放射性35SO42- 或 32PO43- 的培养基培养大肠杆菌,然后让 T2 噬菌体侵染培养后的大肠杆菌,从而使 T2 噬菌体打上 35S 或 32P 的标记。 让这种 T2 噬菌体侵染不含标记元素的大肠杆菌 吸附和侵入后, 强烈搅拌洗涤,再进行离心沉淀,分别测定沉淀物和上清液中的同位素标记。 结果发现,几乎全部 35S 都在上清液中,而几乎全部 32P 和细菌一起出现在沉淀物中。 (三)烟草花叶病毒的拆开与重组实验 1956年,美国的法朗克-康勒特(Fraenkel-Conrat) 将烟草花叶病毒拆成RNA和蛋白质,并分别对烟草进行感染实验; 结果发现只有RNA能感染烟草,并在感染后的寄主中分离到完整的具蛋白质外壳的烟草花叶病毒。 (三)烟草花叶病毒的拆开与重组实验 后来他又将甲、乙两种变种的烟草花叶病毒拆开,在体外分别将甲病毒的 RNA和乙病毒的蛋白质结合,将乙病毒的RNA 和甲病毒的蛋白质结合进行重组。 接着他把这些经过重组的病毒分别感染烟草。结果从寄主分离所得的病毒蛋白质均取决于相应病毒的 RNA。证明了核酸(RNA)是烟草花叶病毒的遗传物质基础。 二、DNA的结构与复制 (一)???????DNA的结构: DNA单体:核苷酸—磷酸+核糖+碱基 A(腺嘌呤) T(胸腺嘧啶) C (胞嘧啶)G(鸟嘌呤) ? 两条核苷酸链 多聚核苷酸 碱基在内——两链上碱基互补配对 (氢键相连) A—T G—C 脱氧核糖、磷酸向外 1、遗传物质在细胞中的存在方式 (一)细胞水平 细胞核; 在细胞质中存在着一些能自我复制的遗传物质,一般称这部分DNA 为质粒。 (二)细胞核水平 真核微生物的细胞核有核膜包围,形成具有完整形态、在光学显微镜下清晰可见的细胞核,核内DNA 与组蛋白结合在一起构成染色体。 原核生物的DNA与很少量蛋白质结合,没有核膜包围,由DNA细丝构成环状染色体。 (三)分子水平 DNA( RNA)--→在DNA 大分子上存在着决定某些遗传性状的特定区段,即所谓基因--→一个基因含若干核苷酸碱基组成的三联密码。 四种核苷酸,按其排列组合方式的不同,可编出三联密码 43=64个,用于决定组成蛋白质的20 种氨基酸顺序。起始密码(AUG)和终止密码(UAA、UGA和UAG)。 2、基因 在生物体内,一切具有自主复制能力的遗传功能单位,都可称为基因。 其物质基础是一个具有特定核苷酸顺序的核酸片断,每个基因一般含有1000bp(碱基对)。 原核生物的质粒 游离于原核生物染色体外,具有独立复制能力的小型共价闭合环状DNA分子,称为质粒,即 cccDNA (circular covalently closed DNA)。 几种细菌的质粒 ⑴F因子(fertility factor):又称致育因子或性因子。是E.Coli等细菌中决定性别的质粒。 ⑵R因子(resistance factor): 又称R质粒,即抗抗生素或化学治疗剂因子。 R因子对多种抗生素有抗性,可作筛选时的理想标记,也可用作基因载体。 ⑶Col因子(colicinogenic factor):即产大肠
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