第四章紫外可见分光光度法要点.pptVIP

二、定量分析 定量分析的依据是 1. 单一组分的测定 （1）吸光系数法 查得吸光系数后根据吸光度求得样品浓度 例4-5 已知维生素B12在361nm处的百分吸光系数为207 。精密称取样品30.0 mg，加水溶解后稀释至1000 mL，在该波长处用1.00 cm吸收池测定溶液的吸光度为0.618，计算样品溶液中维生素B12的质量分数。 解：已知 A =0.618, =207, l =1.00cm 由A =klc 样品中维生素B12含量为 （2）标准比对法 相同条件下，分别配制待测溶液X和标准溶液S，并分别测定吸光度。根据郎伯-比尔定律，可写出 例4-6 为测定维生素B12原料药含量，准确称取试样25.0mg，用蒸馏水溶解后，定量转移至1000ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度后，摇匀。另称取同样重量的B12标准品，用蒸馏水溶解后，稀释至1000ml，摇匀。在361nm波长处，用1cm比色皿分别测得样品溶液和标准品溶液的吸光度分别为0.512和0.518。求试样中B12的百分含量。 解：已知 Ax =0.512 As =0.518 两溶液配制、稀释方法一致 （3）标准曲线法 用标准曲线法测铁的浓度为例： ①配一系列浓度的标准铁溶液，依次测定吸光度 ②作c-A图，即标准曲线 ③将待测溶液吸光度AX代入标准曲线，读出浓度 三磺基水杨酸合铁配合物波长420nm 2. 多组分的测定 当溶液内有两个及以上组分并需测得各自含量时，就是多组分的测定。 （a）吸收光谱互不重叠 （b）吸收光谱部分重叠 （c）吸收光谱相互重叠 （1）吸收光谱互不重叠 此种情况下可以按单组分测定的方法分别求得各个组分浓度 （2）吸收光谱部分重叠 例如右图，可先在无干扰处λ2求得a的浓度，再求得b的浓度 依次求得a和b的浓度 λ2处： λ1处： （3）吸收光谱相互重叠 解方程组法,如右图 λ1处： λ2处： 1 2 解方程组可得： 等吸收双波长消去法 例如右图，选取两个波长，a物质在这两波长处的吸光度相同 λ1处： λ2处： 两式相减，得： 在这两个波长处两组分总的吸光度的差值(△A)只和其中一个组分的浓度有关，可以依次求出各组分浓度。 * 许多化工产品、药品都有紫外-可见吸收，同时，紫外-可见分光光度法具有灵敏度高、准确度高、选择性好、操作简单等特点，因此紫外-可见吸收分光光度法在多个领域得到了广泛应用。 * 配制一系列浓度不同的标准溶液，分别测量它们的吸光度，将吸光度与对应浓度作图（c-A 图）。在一定浓度范围内，可得一条直线，称为标准曲线或工作曲线。然后，在相同的条件下测量未知溶液的吸光度，再从工作曲线上查得浓度。 三、吸光系数 吸光系数k的物理意义为：液层厚度为1cm的单位浓度溶液的吸光度，它表示物质对特定波长光的吸收能力。一个物质在一定条件下的吸光系数为定值。通常有两种表示方法： 摩尔吸光系数ε 百分吸光系数 吸光系数k 物理意义是指样品浓度为1mol·L-1的溶液置于1cm样品池中，在一定波长下测得的吸光度值。量纲为L·mol-1·cm-1 。 ε 104 102 中强吸收 弱吸收 强吸收 （一）摩尔吸光系数ε （二）百分吸光系数 物理意义是指溶液浓度在1%（1g/100mL），液层厚度为1cm时，在一定波长下的吸光度值。量纲为100 mL·g-1·cm-1。 百分吸光系数和摩尔吸光系数有如下关系： 例4-1 用氯霉素（分子量为323.15）纯品配制100 mL含2.00 mg的溶液，使用1.00 cm的吸收池，在波长为278nm处测得其透射率为24.3%，试计算氯霉素在278 nm波长处的摩尔吸光系数和比吸光系数。 解：已知 λ=278nm M=323.15g/mol c=2.00×10-3% T=24.3% S2 S1 S0 h? A ? h? h? h? 吸收光谱 四、吸收光谱 测量某物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长（?）为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制吸光度随波长的变化可得一曲线，此曲线即为吸收光谱。它清楚地描述了溶液对不同波长的光的吸收情况。 从吸收曲线可以得到什么？ 1.同一浓度的有色溶液对不同波长的光有不同的吸光度; 2.对于同一有色溶液，相同的入射光波长，浓度愈大，吸光度也愈大； 3. 对于同一物质，不论浓度大小如何，最大吸收峰所对应的波长(最大吸收波长 λmax) 不变.并且曲线的形状也完全相同。 4.吸收曲线可作为吸光光度法中波长选定的依据，测定