HPLC法测定儿童清肺丸中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量.doc

HPLC法测定儿童清肺丸中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量 戴慧贤 童惠贞 刘潇潇 （广东省食品药品检验所，广东 广州 510180） 摘要：目的：建立儿童清肺丸中盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的含量测定方法。方法：采用HPLC法，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液(4:96)为流动相；检测波长为206nm。0.0005～0.1000 mg/mlr =1.0000）、0.0005～0.1009 mg/mlr =1.0000）范围内线性关系良好；加样回收率盐酸麻黄碱为96.7％，RSD为0.7%（n=6），盐酸伪麻黄碱为97.3％，RSD为1.5%（n=6）。 关键词: 高效液相色谱法（HPLC）；儿童清肺丸；盐酸麻黄碱；盐酸伪麻黄碱 儿童清肺丸由麻黄、炒苦杏仁、石膏等27味药材组成，具清肺，解表，化痰，止嗽用于小儿风寒外束、肺经痰热所致的面赤身热、咳嗽气促、痰多黏稠、咽痛声哑。国家食品药品监督管理局数据库信息显示，该品种有个国家批准文号，两种剂型规格大蜜丸和水蜜丸 1.试剂与试药 安捷伦1260、1100高效液相色谱仪，G1315B型二级阵列检测器DAD； Sartoriu CP224S、CP225D天平； KQ-300DA型数控超声波清洗仪； Aglient Zorbax SB（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱乙（色谱纯）水为超纯水，其它试剂均为分析纯；盐酸麻黄碱对照品（批号171241-200506），盐酸伪麻黄碱对照品（批号171237-200304），均购于中检由北京同仁堂提供批号分别为2013454、1013590、0013174、1013575、2031365、2013362、2013107、1013591共8批大蜜丸样品由承德颈复康药业提供批号分别为295138、295206、295235、195309 共4批大蜜丸样品由敬修堂药业提供批号分别为L08001、L08002、L08003共批水蜜丸样品阴性对照样品由广东省食品药品检验所按儿童清肺丸处方（缺麻黄）照制法模拟制备，即得。 2.1 色谱条件 以Aglient Zorbax SB（250mm×4.6mm，5μm）；以乙腈-0.1%磷酸溶液(4:96)为流动相；检测波长为206nm。理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000。 2.2.1供试品溶液的制备 取装量差异项下的水蜜丸，粉碎，取约3.4g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取约6g，精密称定，精密加水100 ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，用水补足减失的重量，摇匀，离心，精密量取上清液50 ml，加浓氨试液2ml，摇匀，用乙醚振摇提取3次，每次50ml，合并乙醚提取液，加盐酸乙醇溶液（5→100）2ml，混匀，减压回收乙醚或挥尽乙醚，残渣加水使溶解，并转移至10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，放置24小时后，过滤，取续滤液，即得。 精密称取盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱对照品适量，加水制成每1ml含盐酸麻黄碱10(g、盐酸伪麻黄碱5(g的溶液，即得。 取阴性样品适量，按2.2.1下的方法制备，即得。 2.3 线性考察 分别精密吸取溶液盐酸麻黄碱对照品溶液浓度分别为：0.1000、0.0250、0.0050、0.0025、0.0075mg/ml；盐酸伪麻黄碱对照品溶浓度分别为：0.1009、0.0252、0.0050、0.0025、0.0076、0.0005 mg/ml）各10μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积以进样量（mg/ml）（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，盐酸麻黄碱的线性回归方程为：y = 23139x - 2.3241，r =1盐酸伪麻黄碱的线性回归方程为：y = 23455x - 3.9017，r =1。结果表明盐酸麻黄碱在0.0005～0.1000 mg/ml的范围内，盐酸伪麻黄碱在0.0005～0.1009 mg/ml的范围内，线性关系良好。 2.4精密度试验 精密吸取对照品混合溶液20(l，连续进样6次，测定峰面积，盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的RSD分别为0.3%、0.1%。 2.5 重复性考察 大蜜丸：取同一批样品（批号295206，承德颈复康药业提供）10丸，剪碎，混匀，取6份，每份约6g，精密称定，按含量测定的方法制备供试品溶液。按拟定的色谱条件测定，盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱的重复性RSD为1.4%（n=6）1.6%（n=6） 水蜜丸：行了简化验证，取同一批样品（批号L08002，敬修堂药业提供粉碎，取3份，每份取约3.4g，精密称定，按含量测定的方法制备供试品溶液按拟定的色谱条件测定，盐酸麻黄碱重复性RSD为%（n=），盐酸伪麻黄碱重复性RSD为%（n=） 结果表明说明本方法重现性良好。