[旧人教]2012高三生物第一轮复习教案选修5、微生物与发酵工程2-3-1实验三 学习细菌培养的基本技术.docVIP

实验三 学习细菌培养的基本技术 教学目的 通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配制，理解配制培养基的一般步骤和方法。 理解灭菌的基本原理以及实验室中常用的灭菌方法。 初步掌握细菌培养的基本技术。 实验原理 配制培养基时要注意原料的选择和调节适宜的PH 配制好的培养基必须经过灭菌，灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物细胞、芽孢和孢子。 对不同的材料，应当采取不同的灭菌方法：培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，而接种环则用火焰灼烧法 方法步骤 一、培养基的配制 称量 溶化：加入材料（蛋白胨、牛肉膏、琼脂等）加热溶化 调PH：1mol/L的NaOH溶液，PH试纸，7．4～7．6 分装：加热溶化后，每管1/5 加棉塞：棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。不能太松、不难太紧，2/3在管内 包扎 二、灭菌 开锅加水 放入待灭菌的材料：管中向上，竖放，不能太挤 加盖 排出锅内冷空气：达49Kpa时，排气两次 维持：98 Kpa，20min 排气：锅内压力降为0时，才能排气 三、搁置斜面 将锅内试管等取出，在冷却至50℃时，搁置斜面，斜面长度不能超过试管总长度的1/2 四、接种 洗净双手，用酒精擦拭 等手上酒精挥发以后，点燃酒精灯 接种 ①左手夹住菌种试管和接种斜面试管，拧松棉塞 ②接种环灼烧灭菌 ③右手无名指和小指夹住棉塞（不能放下），灼烧管口一周 ④接种环伸入试管内，在末长菌的部位冷却，后挑取少量菌体，立即抽出