脂联素与脂联素抗体通过壳聚糖水凝胶对骨关节炎的影响研究.pdfVIP

中文摘要 目的骨关节炎(OA)是常见的关节疾病，发病率高和致残率较高，并且缺 乏有效控制病情或逆转病情的保守治疗方法。OA的发病机制尚不完全明确，近 年来不少研究发现，力学负荷超载导致机械性的软骨破坏只能部分解释肥胖与 OA的联系，肥胖时异常分泌的脂肪因子可能具有重要的病理生理作用。通过对 OA发病机制的研究，可以发现OA发生发展中的重要作用因子，探索控制病情 的治疗方案，具有重要的临床意义。本研究包括两个部分：1、研究脂肪因子脂 联素和脂联素单克隆抗体对软骨细胞的影响。2、配制壳聚糖．甘油磷酸二钠温敏 水凝胶，并评估其细胞相容性。 方法1、培养软骨细胞，在镜下观察细胞形态，并用脂联素和脂联素单抗刺 激细胞，通过荧光定量PCR检测IL-6和胶原蛋白表达量。2、配制壳聚糖，甘油磷 酸二钠温敏水凝胶，研究凝胶的温敏特性，并通过CCK．8法评估其细胞相容性。 结果1、11．Jg／ml脂联素可促使软骨细胞表达大量的IL．6，较对照组表达量 下降(P0．001)，提示脂联素可刺激软骨细胞产生|L-6。1IJg／ml脂联素单抗刺 激软骨后|L．6的表达量仅稍高于对照组。质量分数相等的脂联素和脂联素单抗同 时刺激软骨细胞，lL．6的表达量与脂联素单独刺激软骨细胞时的表达量无明显差 异。提示脂联素单抗没有阻断脂联素与其受体的作用，或者抗体的量相对于脂联 素量过小。II型胶原酶的表达量显示，脂联素减少了软骨细胞|I型胶原蛋白的表 达，而脂联素抗体可以增加Il型胶原蛋白的表达量。2、通过混合不同比例的壳 聚糖和甘油磷酸，得到了可以在生理温度下凝固的水凝胶。试验发现，cs含量 固定时，胶凝温度随GP的含量增高而降低，胶凝时间随GP的含量增高而缩短。 通过CCK．8法评估CS／GP凝胶的相容性，发现在不同量凝胶的刺激下，软骨细胞 均可缓慢的增长，而细胞活力在缓慢增长后出现了缓慢下降的趋势。 结论1、脂联素可致软骨细胞lL-6表达量增高，并且降低了lI型胶原的表达， 在OA的发生发展过程中起到一定的破坏作用。脂联素单抗可能促进软骨细胞表 达¨型胶原，对促进软骨基质的生成。2、CSIGP水凝胶可在生理温度下形成温 度敏感水凝胶，与软骨细胞共培养时，细胞表现出了一定的活力和增殖力，提示 CS／GP可进一步应用于关节腔内注射载药的研究。 关键词脂联素、脂联素单抗、骨关节炎、壳聚糖、温度敏感水凝胶 ABSTRACT and achronic diseaseof Backgroundaims：Osteoarthritis(OA)isjoint degenerative the is inelder is oneofthetenmost synovialjoint．OA frequentpopulation，italready diseasesin countries．Forsome is todo disabling developed patients，therenothing buttoreceivean OA of isstillunclear． arthroplastysurgery．Todate，etiopathogenesis Recentstudiesshowthatmechanicalstresscaused distructioncan cartilage only the partlyexplainassociationbetween and secretedin ob