第三讲转化重点介绍.ppt

转化作用的发生：除了肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）外还有 1 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis） 2 嗜热脂肪芽孢杆菌（ Bacillus stearothermophilus） 3 流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae） 4 ………… DNA吸收情况？ 1 外源基因在宿主细胞中的表达情况 (若不表达：不能进行正确的转译或转录) 2 外源DNA不能在宿主细胞中长期的保持 （DNA片段不是复制子，随宿主细胞被稀释；即使有，在异质寄主细胞中也不可能） 复制子：细菌或病毒基因组只有一个复制起点，这 样的DNA分子特称为复制子 解决办法：将DNA片段连接到适当的复制子上，将这类复制子称为载体或克隆载体。 感受态细胞制备Preparation of competent cell 受体细胞经过一些特殊方法(如电击法、CaCl2、RbCl等化学试剂法)的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞(Compenent cells)。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子（Transformant，即带有异源DNA分子的受体细胞）。 CaC