植物 TAG 合成途径相关基因克隆分析.docVIP

植物 TAG 合成途径相关基因的克隆与分析 植物种子中的油脂主要以三酰甘油（TAG）的形式储存，TAG形式的产品在食品、保健品和工业产品方面都具有较大的经济价值 （王镜岩，2000）。为了对含油量相关基因的功能进行深入分析，本研究克隆或合成了催化整个三酰甘油合成途径的含油量相关基因。利用同源序列法从油菜中克隆含油量相关基因DGAT的全长cDNA序列，对它们的序列特征进行了生物信息学分析. 2.1 材料与方法 2.1.1 材料 2.1.1.1 供试植物材料 甘蓝型油菜（Brassica napus L）中双 9 号（ZS9）基因组 DNA 用于本研究目的基因的分离，种子由本实验室保存。 2.1.1.2 菌株与质粒 大肠杆菌（Escherichia coli.）克隆菌株 Top10，购自 Invitrogen 公司；克隆目标基因载体 pAmp由本实验室吴刚博士构建，商业化植物转化载体 pBI121（Kanr）购自 ToYoBo 公司。 2.1.1.3 酶与生化试剂 ReverTra Ace-α-TM 试剂盒、 高保真DNA聚合酶（Kod Plus）购自ToYoBo公司； 1kb DNA Ladder Marker、 Taq DNA聚合酶购自Fermentas公司； Trizol购自Invitrogen公司; T4 DNA连接酶购自NEB生物公司； 限