原核基因表达调控-1解析.pptVIP

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  • 2016-07-01 发布于湖北
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基因转录开放,β-半乳糖苷酶在细胞内的含量可增加1000倍。 乳糖(别乳糖)作为诱导剂,与R结合起去阻遏作用(derepression),诱导了利用乳糖的酶类基因转录开放。 调控蛋白的活性由信号变构控制。在诱导物的作用下,阻遏蛋白构象改变而失去与操纵基因(O1)的结合能力。 a.没有诱导物存在下,两个二聚体之间形成铰链,因此N端结构域能与操作子序列结合。 b.诱导物-Lac抑制子的二聚体。与诱导物的结合导致结构的改变,从而降低了抑制子对操作子的亲和性。 许多调控蛋白都是变构蛋白(allosteric protein),通过与效应物结合改变构象而改变活性,起到调节基因转录表达的作用。 在研究工作中很少使用乳糖作为诱导剂,因为培养基中的乳糖会被诱导合成的β-半乳糖苷酶催化降解,其浓度不断发生变化。实验室常用两种乳糖类似物——异丙基巯基半乳糖苷(IPTG)和巯甲基半乳糖苷(TMG),在酶活性分析中常用发色底物O-硝基半乳糖苷(ONPG)。因为它们都不是半乳糖苷酶的底物,所以又称为安慰性诱导物(gratuitous inducer)。 由于阻遏蛋白偶尔会脱离操纵子基因,所以操纵子的转录并非完全关闭,仍会有本底水平的表达,细胞内会有几个分子的β-半乳糖苷酶和透性酶。 葡萄糖对lac操纵子表达的影响 葡萄糖是细菌优先利用的糖类。当葡萄糖和其他糖类(比如乳糖)同时存在时,细菌只利用葡

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