医药生物技术产品的后处理工程解析.pptVIP

第五章 医药生物技术产品的后处理工程 重组蛋白质的浓度测定和分子量测定 蛋白质的浓度测定；紫外法比较方便，又不损耗蛋白质样 品。在未知摩尔消光系数的情况下，可以简单地测定280nm 和260nm光吸收值，然后用公式计算： 蛋白质浓度(mg/ml)=1.55A-0.76A260 用考马斯蓝G-250测蛋白质浓度时，是在酸性条件下使试 剂与蛋白质产生反应，其特征吸收率由465nm转移到595nm ， 在一定蛋白质浓度范围内595nm的吸光度与蛋白质浓度成线形 关系，因此可作为定量依据。 凝胶过滤法是测定蛋白质分子量的最常用的方法，已 广泛使用的是Sephadex系列（G-75，G-100等）和HPLC 凝胶过滤系统。SDS是实验室测定蛋白质分子量的 常规方法。 四. 肽谱分析 肽谱分析是用酶解或化学降解（溴化氰法等）目的蛋 白质后对生成的肽段进行的分解分析，它也是检测目的产 物的指标之一。 * * 后处理工程通常称之为下游工程(Downstream Processing); 它泛指从工程细胞或工程菌的大规模培养一直到目的产物的分离纯化、质量控制、产物保存等一系列操作技术，其中最重要的组成部分是产物的分离纯化。 本章主要介绍细胞破碎与固液分离，目的产物的分离