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第三章 第六节 薄层色谱鉴别 第三章 第六节 薄层色谱鉴别 第三章 中药制剂的理化鉴别技术 【本章学习内容】 * 复习：鉴别-一般化学反应法 化学鉴别：抗干扰能力差 显色、↓、↑、荧光 例 二妙丸中苍术的鉴别 苍术酮 苍术炔 ? ? ? ? 试剂 组分 薄层色谱鉴别--简述 * 薄层色谱鉴别--简述 特点 设备简单 操作简便 专属性强 适用范围 药材和饮片 植物油脂和提取物 单味制剂和成方制剂 * 薄层色谱鉴别--系统适用性试验（实验条件） 分离度 应显示两个清晰分离的斑点 比移值 薄层色谱鉴别--方法 仪器与用具 薄层板 市售薄层板 按效能分 普通薄层板 高效薄层板 按固定相分 硅胶薄层板 硅胶GF254薄层板 聚酰胺薄膜等 自制薄层板：特别处理和化学改性 * 薄层色谱鉴别--方法 仪器与用具 点样器 定量点样毛细管 规格：0.5μl、1.0μl、2.0μl、5.0μl和10μl等 要求 标示容量准确 管端平整光滑，管壁洁净，液体流畅 点样辅助设备：点样支架、半自动或自动点样器 《中国药典》规定采用定量点样。 * 薄层色谱鉴别--方法 仪器与用具 展开容器 -展开缸 种类 水平式 直立式（常用） 平底展开缸 双槽展开缸（常用） 节省溶剂 减少污染 便于预平衡 控制展开缸内的湿度 要求 应密闭，保持密封状态 玻璃器皿，如生物标本缸等不能保证展开的质量 * 薄层色谱鉴别--方法 仪器与用具 显色与显色装置 喷雾显色 玻璃喷雾瓶 雾滴应细小并且均匀 浸渍显色 玻璃容器 适宜的展开缸中 蒸气熏蒸法显色 双槽展开缸 适宜大小的干燥器 * 薄层色谱鉴别--方法 仪器与用具 检测装置 装有光源 可见光 254nm紫外光光源 365nm紫外光光源 滤光片暗箱 附有摄像设备 * 薄层色谱鉴别--方法 试药与试液 各种对照品 各品种项下规定的薄层板等 * 薄层色谱鉴别--方法 操作方法 对照物的选择与设置 对照物质 对照品 对照药材 对照提取物 * 类别 对照品 对照药材 对照提取物 总计 2005版收载数 284 219 11 514 2010版收载数 492 369 16 877 新增数 208 150 5 363 薄层色谱鉴别--方法 操作方法--对照物的选择与设置 对照物的选择与设置 对照品对照：鉴别单一成分 对照提取物对照：是否含有某一药材提取物 例如银杏叶片、银杏叶胶囊、银杏叶滴丸等的鉴别 对照药材对照：是否含有某一药材 对照品和对照药材或对照提取物同时对照 ：增加鉴别结论的可靠性 大补阴丸处方中黄柏的薄层色谱鉴别 小檗碱对照品 黄柏对照药材 同时鉴别多种成分或多种药材 如桂林西瓜霜中[鉴别]（4）中 鉴别青黛（靛玉红对照品）和大黄（大黄素对照品、大黄酚对照品） 百合固金口服液 白芍（芍药苷对照品） 玄参（哈巴俄苷对照品）。 * 薄层色谱鉴别--方法 操作方法 供试液的制备 提取方法 溶剂提取法 蒸馏法 升华法 分离方法 中性氧化铝柱 大孔吸附树脂柱 离子交换树脂柱 C18柱 * 薄层色谱鉴别--方法 操作方法—点样 点-底距离：10~20mm 8~10mm 点-边距离：10~15mm 点-点距离： =8mm =5mm 圆点直径：=3mm =2mm 操作方法—展开 展开剂浸板深度：5mm 展距： 8~15cm 5~8cm 操作方法—检测 显色 检视 * 薄层色谱鉴别--方法 注意事项 供试液的净化程度 吸附剂的性能 薄层板的质量 点样（原点）的质量 展开剂的组成及饱和情况※ ※ 对照品的纯度 展开的距离 相对湿度※ 温度※ * 薄层色谱鉴别--方法 注意事项 展开剂的种类和配比 分离酸性成分：展开剂中加酸性试剂 酸性成分：有机酸、酚类等 药味：甘草、熊胆、大黄、白芍等 酸性试剂：甲酸、冰醋酸等 分离碱性成分：展开剂中加碱性试剂 碱性成分：生物碱等 药味：黄柏、黄连、三颗针等 碱性试剂：浓氨试液 溶剂的极性：Rf值（0.3－0.7)——例如黄连 * 薄层色谱鉴别--方法 注意事项 展开剂的种类和配比 溶剂的极性：Rf值（0.3－0.7)——例如黄连 图3-9a展开剂为正丁醇-冰醋酸-水（7:2:1） 图3-9b展开剂为正丁醇-三氯甲烷-丙酮-冰醋酸-水（7:5:4:1:1） * 图3-9 黄莲薄层色谱图 1.非洲防己碱；2.药根碱；3.巴马汀；4.小檗碱；5.表小檗碱；6. 黄连碱；7.下黄连 薄层色谱鉴别--方法 注意事项 相对湿度 * 图3-10