脂肪干细胞部分去分化研究.doc

大连理工大学本科毕业设计（论文） 脂肪干细胞部分去分化的实验研究 Experimental Research on Partial Dedifferentiation of Human Adipose-Derived Stem Cells 学 院（系）： 化工学院 专 业： 化学工程（英强） 学 生 姓 名： 姜 乔 学 号： 201048531 指 导 教 师： 李香琴 评 阅 教 师： 201048549 完 成 日 期： 2014.6.10 大连理工大学 Dalian University of Technology 摘 要 干细胞，是一类尚未充分分化，具有自我复制能力的多能细胞，自从被人们发现，就因为其有能力分化成各种组织器官而被人们高度重视。而脂肪，又是人体内含量较多的成分之一。近些年来，从脂肪中分离提取干细胞，并加以培养充分利用成为了生物与医学相联系的交叉领域，得到了越来越多人的重视。 此次研究在充分了解脂肪干细胞的背景知识下，通过对脂肪干细胞的分离，体外培养和检测鉴定来进一步了解脂肪干细胞在分离与培养过程中的生物学特性，并验证了利用诱导脂肪干细胞来分化成各个器官的生物学优势。而后的检测鉴定，清晰得表明了脂肪干细胞在某种诱导条件存在下，具有较强的分化能力，能够在体外向骨，脂肪和软骨等方向分化。而为了再次证明脂肪干细胞的分化能力，本次研究设计了一实验即利用质粒转染脂肪干细胞，通过观察其对某种特定基因的表达情况来检测脂肪干细胞是否通过重编程来分化成其他组织及细胞。为了完成这一实验，首先要利用质粒扩增技术来扩增pIRES2-EGFP-hOKSM质粒DNA。而后，利用这种质粒来转染脂肪干细胞。本次实验对pIRES2-EGFP-hOKSM质粒DNA的扩增比较成功，最后获得得浓度为1.1μg/μL。利用此种质粒转染之前分离提取并加之培养得脂肪干细胞。最后证明了脂肪干细胞向上皮样细胞的转化过程。 关键词：脂肪干细胞；分化潜能；质粒；转染 Experimental Research on Partial Dedifferentiation of Human Adipose-Derived Stem Cells Abstract Stem cell is a kind of cell that is not fully differentiated. With the ability of self-replicating, it is a kind of multipotent cells. Since stem cell has the potential to differentiate into all kinds of tissues and organs, people pay much attention ever since it was publicized. Adipose, a composition largely existing in human body is bored by more and more modern people. So to separate stem cells from adipose in human body is now a popular subject in both biochemistry and medical science. The research is based on the fully understanding of the background knowledge of adipose stem cells. Through the separation of adipose stem cells in vitro and detection and identification to learn more about the biological characteristics of adipose stem cells. To verify the use of induced adipose stem cells to differentiate advantage into the biology of various organs. Then the detection and the identification, have clearly demonstrated induction of adipose