2011-4微生物标本采集技术(临床环镜空气)资料.ppt

微生物标本采集技术 --临床微生物 ---环境微生物 临床微生物标本采集技术 正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提 基本原则 1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 8.送检标本应注明来源和检验目的 9.混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养 如何提高细菌阳性检出率 标本采集时机 标本采集方法 标本的质与量 标本的运送与保存 镜检筛选合格标本 高质量、多种分离培养基 培养环境 痰标本采集 关于咳痰标本 在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1～2h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 ; 采集标本过程中要有专业的医务人员指导; 病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题 细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌） 真菌（包括肺孢子菌） 病毒 支原体、衣原体与立克次体 原虫 寄生虫 痰标本采集-----自然咳痰标本 患者清晨起床后，用清水或冷开水反复漱口去除过量的口腔细菌，有假牙者应取下假牙。 先轻咳，咳出口腔中的痰液弃去，在用力深咳，从气管咳出呼吸道深部的痰，直接吐入清洁、无菌的容器中。 无痰可用3％～5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰； 也可用物理疗法、体位引流等法取痰； 痰标本采集-----吸痰 吸痰：无法咳痰或不合作者、人工气道者，戴好无菌手套，无菌集痰器分别连接吸引器和无菌吸痰管。按吸痰法将痰吸入无菌集痰器内，加盖送检。 经支气管镜直接吸引: 注意严格无菌操作 PSB 及BAL 对可疑的VAP患者进行纤支镜保护样本刷（PSB)及支气管肺泡灌洗(BAL)采样， 以此技术取支气管分泌物不易污染，进行呼吸道感染细菌定量或半定量培养，若分离细菌浓度103CFU/ML(PSB)及104CFU/ML (BAL)，可作为诊断标准，其敏感性为76%一83%，特异性为91%一100%。通过与尸检对照，已证实PSB和BAL技术诊断的正确性，被认为是目前最可靠的诊断方法。 肺泡灌洗液直接镜检BAL~D被认为对快速诊断、及早治疗VAP是一个有价值的方法。 尿标本正确采集---清洁中段尿标本 应保证尿液在膀胱内至少停留4h以上。最好留取早晨清洁中段尿标本， 方法：患者睡前少饮水，清晨起床后先用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；开始排尿，将前段尿排出，弃去，不要停顿，直接将中段尿约10?20ml直接排入专用的无菌容器中，立即送检。 容器内是无菌的，所以打开容器盖后，应拿在手中，不要随意乱放。记录留取标本的时间，保证在留取标本后1小时内送至检验科。 尿标本正确采集---留置导尿 消毒导尿管外部(接头上端近会阴部）, 按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液10ml，操作时注意防止混入消毒剂（推荐用三步清毒法： 75％乙醇 ----2%碘酒----75%酒精脱碘待干）. 注意不能从收集袋中采集尿液。 血培养标本 采集与运送 血培养标本采集 1.手清洁：无明显污染使用速干乙醇消毒液洗手. 2.血培养瓶口消毒：75%乙醇消毒一遍，待干60 s . 3.静脉穿刺消毒：推荐用三步法 (1).用75％乙醇清毒采集部位 (2).用2%碘酒从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿刺皮肤2遍，待干。 （3）75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒液 ,待酒精挥发干燥后采血 。 2009年美国感染性疾病学会推荐的经皮抽血局部皮肤消毒或导管接口用碘酊或酒精或酒精氯已定(0.5%),不建议使用聚维酮碘. 采血量 成人采血量是10 ml -20 ml /套 婴儿，3－5ml/套 操作注意事项 （1）从静脉采血，不建议从动脉采血， （2）用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行第二次穿刺,应换针头) 直接注入消毒后的血培养瓶。 （3）血抽到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检,切勿冷藏！ （4）多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。除非无法作静脉穿刺取血，否则不应从留置导管内取血。 （5）抽血前应将标签贴于血培养瓶颈上，标签内容包括病人基本信息、采血时间、采血部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则仪器无法识别。 血培养次数和采血时间--1 采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在患者发热期间越早越好，以发热高峰前1h内或病人寒战和发热开始时采集为宜。在10分钟内于不同部位采集