5-1基因的转录摘要.pptVIP

四、转录水平的调控 顺式作用元件：基因转录调控区。 （增强子、启动子、沉默子及应答元件等） 反式作用元件：转录因子。与顺式作用元件相结合，影响转录的一组调节蛋白。 根据功能将转录因子分为3类：基本转录因子，转录激活因子，转录抑制因子。 （1）基因转录的顺式作用元件和反式作用元件 真核生物 1) 顺式作用元件(cis-acting element) ——可影响自身基因表达活性的DNA序列 B A DNA 编码序列 转录起始点 不同真核生物的顺式作用元件中也会发现一些共有序列 ，如TATA盒、CAAT盒等，这些共有序列是RNA聚合酶或特异转录因子的结合位点。 2) 真核基因的调节蛋白 还有蛋白质因子可特异识别、结合自身基因的调节序列，调节自身基因的表达，称顺式作用。 由某一基因表达产生的蛋白质因子，通过与另一基因的特异的顺式作用元件相互作用，调节其表达。 反式作用因子(trans-acting factor) 这种调节作用称为反式作用。 c DNA a DNA 反式调节 C 顺式调节 mRNA C 蛋白质C B A mRNA 蛋白质A A （2）转录后水平的调控 同一种基因的转录产物前体mRNA可以被加工成几种不同的mRNA。 几乎所有真核生物的mRNA都有5’帽子结构（某些真核细胞中的病毒除外，如脊髓灰白质炎病毒mRNA），不是都有3’尾巴，也不是都必须经过拼接。 真核基因根据加工过程的差异可分为：只编码产生一种蛋白的基因；可编码两种或更多种蛋白的转录单位。 （2）转录后水平的调控 mRNA前体的选择性拼接 人的蛋白质的数目远远多于基因的数目，人们认为，一种原因是基因的转录产物会在体内进行可变的剪接，造成不同外显子的组合，从而翻译出不同的蛋白质。 外显子 基因DNA 内含子 转 录 初级RNA 成熟RNA 成熟RNA 剪接 可变剪接 小分子RNA 小分子RNA（micro－RNA），是一种大小约21—23个碱基的单链RNA，由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，这些非编码小分子RNA（miRNAs）参与调控基因表达。 控制基因表达的两个关键步骤是DNA的转录和翻译。小分子RNA不会被翻译以合成蛋白质，而是与靶mRNA结合，通过调节翻译或降解靶mRNA来调控表达。 miRNAs参与生命过程中一系列的重要进程，包括早期发育，细胞增殖，细胞凋亡，细胞死亡，脂肪代谢和细胞分化等。有些miRNA起着抑癌基因的功能。 逆转录(reversetranscription) 逆转录酶：又称RNA指导的DNA聚合酶。是以RNA为模板合成DNA的酶。1970年由H.M.Temin和D.Baltimore分别于动物致癌RNA病毒中发现，他们因此获得1975年诺贝尔生理学或医学奖。 当RNA致癌病毒进入宿主细胞后，其逆转录酶先催化合成与病毒RNA互补的DNA单链，继而复制出双螺旋DNA，并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体DNA中，此整合的DNA可能潜伏（不表达）数代，遇适合的条件时被激活，利用宿主的酶系统转录成相应的RNA，其中一部分作为病毒的遗传物质，另一部分则作为mRNA翻译成病毒特有的蛋白质。最后，RNA和蛋白质被组装成新的病毒粒子。在一定的条件下，整合的DNA可使细胞转化成癌细胞。 逆转录: 与通常的遗传信息传递方式（DNA—RNA）不同，逆转录是以RNA为模板，在逆转录酶的作用下合成出DNA，而后再以此DNA为模板，通过转录—翻译的过程，实现遗传物质的生物学功能。 与mRNA有关的常用实验技术 RT-PCR Real time RT-PCR DDRT-PCR (差异显示) cDNA芯片 复习思考题 1、人类有多少个基因？人和人之间为什么千差万别？ 2、什么是miRNAs，简述其参与基因表达的调控作用机理？ * 上次课内容回顾与思考 DNA复制的基本特征 原核生物与真核生物复制特点比较 端粒结构特点，端粒酶如何调节端粒的长度 DNA的体外复制（PCR） 第二节 RNA的生物合成----转录RNA Biosynthesis----Transcription 转录是基因表达的第一步，也是关键的步骤，一个基因的遗传信息能否表达往往是在转录阶段。 (一) 基因的转录 DNA mRNA Transcription Cell Polypeptide (protein) Translation Ribosome 转录:以DNA为模板，在依赖于DNA的RNA聚合酶（RNA polymerase）作用下合成mRNA，将遗传信息从DNA分子转移到mRNA分子的过程。 转录是基因表达的中心环节