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甘蔗糖蜜预处理 水解脱除、脱钙: 含糖分45%-55%的糖蜜稀释?蒸汽加热?泥渣分离机或沉淀槽分离杂质? 蒸汽间接杀菌? 冷却入罐发酵。 §6 低糖流加工艺及后期补糖工艺 要点: 流加入发酵罐的糖浓度必须是高浓度 提高流加糖占总糖的比例; 将摄氧率(通风)与补料速率关联; 经验:时间选择发酵中前期,即在12-14h时开始流加,此时残糖3%-5%,尽可能使流加糖与耗糖速率保持平衡。 §7 采用温度敏感突变株发酵生产谷氨酸 碱基置换 ? 对应的酶在稍高温度下易失活? 不能生成细胞膜合成所需物质?较低温度菌体正常生长,当温度提高到一定程度时,菌体便停止生长而大量产酸。 1021突变株的强制发酵工艺 一级种子培养基: 葡萄糖30g/L,玉米浆40mL/L,尿素5.5g/L,酵母膏5.0g/L, 磷酸氢二钾2.1g/L ,硫酸镁0.7g/L,锰离子、铁离子各2mg/L,维生素B1200μg/L, 生物素150 μg/L, pH7.0-7.2,0.075MPa杀菌20min。 一级种子培养条件 取新鲜活化斜面菌种2支,各用10mL无菌肉汤培养基全部洗下,转接于装有1200mL种子培养基的5000mL三角瓶中,30℃,86r/min,振荡培养13h。 1021突变株的强制发酵工艺 二级种子培养基: 淀粉水解糖26g/L,玉米浆30mL/L,菌体水解液60g/L, 磷酸氢二钾3.0g/L ,硫酸镁1.0g/L,锰离子、铁离子各0.2mg/L,维生素B1400μg/L, 生物素200 μg/L, pH7.1-7.2,0.1MPa杀菌10min。 二级种子培养条件 取4800mL一级种子培养液,转接于装有 400L二级种子培养基的600L二级种子罐中,30℃,240r/min通气培养26h.0-6h控制风量10m3/h,7-16控制风量25m3/h, 17-26控制风量50m3/h.培养过程中,视pH、残糖情况及时流加液氨及640g/L浓缩糖,使pH维持在7.1-7.2,残糖维持在15g/L。 1021突变株的强制发酵工艺 发酵培养基 淀粉水解糖60g/L,玉米浆30mL/L,甜菜糖蜜50mL, 磷酸氢二钾4.5g/L,硫酸镁1.5g/L,锰离子30mg/L、铁离子30mg/L,维生素B1400μg/L, 生物素600 μg/L, pH7.2-7.3,0.1MPa杀菌15min。 发酵工艺 取二级种子接15%gf 2700L/6000L 发酵罐中,220r/min发酵32h。 第八节 提高发酵产酸率的主要措施 一、选育高产菌种,改良菌种性能 二、改进发酵工艺 一次高浓度糖发酵 降低发酵糖浓度,连续流加糖发酵 混合碳源发酵 自动化 通电发酵法 固定化连续发酵生产谷氨酸 一次高浓度糖发酵 一次性投糖浓度达180-200g/L进行发酵。 优点:操作方便,设备利用率高,谷氨酸浓度高,容易提取。 缺点及解决措施: 糖浓度高,渗透压大,菌体不适应。同时糖浓度高,氧传递阻力增大,应强化供氧。选育耐高渗透压的菌种,并控制发酵工艺条件。 降低发酵糖浓度,连续流加糖发酵 优点 降低发酵糖浓度,可降低渗透压,有利于菌体生长和代谢产物的排泄。同时提高氧的传递速率,提高溶氧水平。特别是对采用高生物素、大接种量,添加青霉素破壁的发酵工艺更为重要。? 两种工艺的比较 序号 初糖 流加糖浓度 总糖 谷氨酸浓度 转化率 1 60g/L 20-40g/L 200g/L 93g/L 46.3% 2 5g/L 2-5g/L 198g/L 100g/L 51% 混合碳源发酵 采用葡萄糖和醋酸混合碳源比单一葡萄糖为碳源的发酵谷氨酸对糖转化率提高30%。即使是全部为糖质原料也可选用不同种原料混合使用,既可用部分廉价原料又能提高产酸。 思考题 试述谷氨酸发酵培养基对发酵的影响,及控制措施。 试述谷氨酸发酵条件对谷氨酸发酵的影响及控制措施。 简述谷氨酸发酵过程中的主要变化及中间代谢控制 简述甜菜糖蜜添加吐温发酵的机理 简述甘蔗糖蜜添加青霉素流加糖发酵的机理 简述采用温度敏感突变株发酵生产谷氨酸的机理 不同发酵阶段的供氧需求P96 在菌体生长期,供氧不足时,菌体生长受到抑制,积累乳酸,菌体收率少;但过高氧水平会造成浪费,抑制菌体生长,在高氧水平下生长的菌体不能有效地合成谷氨酸。 谷氨酸生成期,在细胞最大呼吸速率时,谷氨酸产酸量最大。因此,在谷氨酸生成期要求充分供氧,以满足最大呼吸的需氧量。 供氧与其他发酵工艺条件的关系 培养基营养丰富,糖浓度高,生物素含量高,需氧量大。 培养基浓度大,氧的传递阻力大,需要增加供氧。 生物素浓度浓度增加,耗糖速度增大,需要增加供氧。 采用间断或连续测定排气中CO2浓度的方法调节通气量,满足供氧需求。以13%为分界点。 有利于 发现噬菌体感染 发现
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