第十四章-高效液相色谱法技巧.ppt

液相色谱分离类型选择参考表 相对分子 质量＞2000 相对分子 质量＜2000 排阻色谱，水为流动相 排阻色谱，非水流动相 同系物——分配色谱 异构体——吸附色谱 分子大小差异——排阻色谱 反相液一液色谱 排阻色谱，水为流动相 碱——阳离子交换色谱 酸——阴离子交换色谱 反相离子对色谱 溶于水 不溶于水 溶于水 不离解 可离解 不溶于水 离子与 非离子 样品 * * * * * * * * * 梯度淋洗(gradient elution) 　 梯度淋洗是指在分离过程中使流动相的组成随时间改变而改变。通过连续改变色谱柱中流动相的极性、离子强度或pH等因素，使被测组分的相对保留值得以改变，提高分离效率。梯度淋洗对于一些组分复杂及容量因子值范围很宽的样品分离尤为必要。 HPLC中的梯度淋洗的作用十分类似于气相色谱中的程序升温，两者的目的都是为了使样品的组分在最佳容量因子值范围流出柱子，使保留时间过短而拥挤不堪、峰形重叠的组分或保留时间过长、峰形扁平、宽大的组分，都能获得良好的分离。 梯度淋洗的优点： 可以改进复杂样品的分离，改善峰形，减少拖尾并缩短分离时间。另外，由于滞留组分全部流出柱子，可保持柱性能长期良好。 固定相 高效液相色谱固定相以承受高压能力来分类，可分为刚性固体和硬胶