菊花的组织培养23665658重点.ppt

植物的组织培养又叫离体培养，指植物的组织、器官或细胞等（外植体课本34页旁栏）在离体条件下，通过无菌操作，在人工控制条件下（一定的营养物质、激素、温度等其他外界条件）进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。 （回想）植物组织培养 原理 概念： 原因： 应用： 二、植物组织培养的基本过程 三、影响植物组织培养的因素： 3、植物激素 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 课题延伸（略） 练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 * * * * 菊花的组织培养 一、植物组织培养的概念 植物细胞的全能性 细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 生物体的每一个细胞都是由同一个受精卵有丝分裂而来，都含有该物种所特有的全套遗传物质 微型繁殖、作物脱毒、人工种子 脱分化（或去分化）：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。　 细胞分化：植物个体发育过程中，细胞在形态、结构和功能上会出现稳定性的差异。实质？ 愈伤组织：细胞排列疏松而无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。 几个概念 1、材料（外植体）的选取 （1）不同植物的组织培养难度不同 什么样的植物容易进行组织培养？ （2）同一种植物的不同组织培养难度不同 什么样的组织容易进行组织培养？ 容易进行无性生殖的植物，如烟草、胡萝卜 幼龄、保存时间短的组织 菊花的组织培养一般选用何种材料？ 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 2、营养成分（培养基） （1）植物组织培养常用的培养基？ MS培养基 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 （2）MS培养基的主要成分？ 培养基中的各种成分的作用是什么？ 大量元素和微量元素提供植物细胞需要的各种无机盐；蔗糖提供碳源的同时维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是满足离体植物细胞的特殊营养物质需求 课本33页旁栏思考： 微生物培养基以有机营养为主， MS培养基则需提供大量无机营养 （1）关键激素是什么？ （2）两种激素的不同使用顺序出现不同结果 （3）两种激素的不同用量出现不同结果 4、pH、温度、光照等 菊花组织培养的PH？温度？光照？ 生长素，细胞分裂素 思考：胡萝卜组织培养的光照要求与菊花组织 培养相同吗？ 分化频率高 同时使用 细胞既分裂、也分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 实验结果 使用比例 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 生长素 细胞分裂素 ＝ 有利于根的分化 有利于芽的分化，抑制根的分化 促进愈伤组织生长 如何控制细胞的脱分化与去分化？ 菊花的组织培养 再分化 材料性质： 培养基：营养物质、调节物质环境条件：pH、温度、光照 基本原理: 细胞的全能性 基本过程: 脱分化 愈伤组织 影响因素： 操作流程： 外植体的消毒 接种 配制MS固体培养基 培养 移栽 栽培 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 流水冲洗—无菌纸吸干—70%酒精—无菌水冲洗—无菌纸吸干—0.1%氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 （流水是为消毒吗？能消毒的是什么？无菌水冲洗是为了干啥？） （哪6步？） 1、配制各种母液（大量元素、微量元素各浓缩多少倍？用量较小的有机物呢？） 2、配制培养基（菊花组培是否添加植物激素？） 3、灭菌（哪种灭菌方法？） 注意接种时的各种无菌操作。 将菊花茎段插入培养基时特别应注意什么？ 最好在哪儿培养？温度？光照？定期消毒？ 直接移栽到土壤中吗？ 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？