磺胺在蜂蜜中的提取方法摸索(elisa酶联免疫)剖析.pptVIP

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2017-05-16 发布于湖北
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磺胺在蜂蜜中的提取方法摸索(elisa酶联免疫)剖析.ppt

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猪肉、鸡肉、鱼肉样品中磺胺提取方法（1）准确称取虾肉组织2.00 ± 0.02 g于50 mL离心管中。（2）加入乙酸乙酯4 mL，漩涡混合5 min，4000 r/min离心5 min。（3）取上清液1 mL于10 mL离心管中，50～60 ℃氮气吹干。（4）加入正己烷1 ml溶解干燥残留物，漩涡混合1 min，再加入 PBS缓冲液 1 mL，漩涡混合 1 min ，4000 r/min离心10 min，取下层水相50 μl用于分析检测。蜂蜜中磺胺提取方法（1）准确称取蜂蜜1.00 ± 0.02 g于50 mL离心管中，按要求加入磺胺类药物标准溶液，漩涡混合30s （2）加PBS 2 mL，涡旋1min至溶解，超声30min；（3）加入乙腈4 mL，漩涡混合5 min，4000 r/min离心5 min；（4）取上清液3mL于10 mL离心管中，50～60 ℃氮气吹干；（5）加入PBS缓冲液 1mL(稀释2倍)，漩涡混合 1min ；取50 μl用于分析检测。牛奶中磺胺提取方法（1）准确称取虾肉组织2.00 ± 0.02 g于50 mL离心管中。（2）加入乙酸乙酯8 mL，漩涡混合5 min，4000 r/min离心5 min。（3）取上清液2 mL于10 mL离心管中，50～60 ℃氮气吹干。（4）加入正己烷1 ml溶解干燥残留物，漩涡混合1 min，再加入 PBS缓冲液 1 mL，漩涡混合 1 min ，4000 r/min离心10 min，取下层水相50 μl用于分析检测。编号 OD值-1 OD值-2 信号响应浓度(ppb) 交叉反应率(%) 实测浓度(ppb) 添加浓度(ppb) 回收率% 空白 BK 1.873 1.896 1.3387 BK 1.958 1.906 1.2160 磺胺邻二甲氧嘧啶 SDM 0.498 0.45 23.2388 451 5.1549 5 103.10 SDM 0.425 0.4 26.3184 451 5.8381 5 116.76 磺胺甲基嘧啶 SM1 0.685 0.618 16.2266 313 5.1894 5 103.79 SM1 0.701 0.691 14.8293 313 4.7425 5 94.85 磺胺嘧啶 SD 0.665 0.708 15.1171 308 4.9149 5 98.30 SD 0.721 0.801 13.0017 308 4.2271 5 84.54 磺胺二甲基异嘧啶 SM2 0.764 0.807 12.3728 241 5.1243 5 102.49 SM2 0.754 0.894 11.4455 241 4.7403 5 94.81 磺胺二甲氧嘧啶 SDM 0.829 0.947 10.0553 175 5.7400 5 114.80 SDM 0.948 0.895 9.3962 175 5.3638 5 107.28 磺胺噻唑 ST 1.514 1.586 2.6341 58 4.5306 5 90.61 ST 1.554 1.601 2.4915 58 4.2854 5 85.71 磺胺氯哒嗪 SCPA 1.561 1.651 2.3519 58 4.0678 5 81.36 SCPA 1.658 1.695 2.0392 58 3.5270 5 70.54 磺胺氯吡嗪 Esb3 1.587 1.613 2.3806 67 3.5628 5 71.26 Esb3 1.68 1.568 2.2678 67 3.3939 5 67.88 磺胺甲氧哒嗪 SMP 1.612 1.625 2.2932 57 4.0424 5 80.85 SMP 1.629 1.706 2.0767 57 3.6608 5 73.22 蜂蜜 5ppb 编号 OD值-1 OD值-2 信号响应浓度(ppb) 交叉反应率(%) 实测浓度(ppb) 添加浓度(ppb) 回收率% BK 1.542 1.596 1.7566 1.571 1.606 1.6792 SDM 0.374 0.401 27.0038 451 5.9901 5 119.80 0.397 0.411 25.9927 451 5.7658 5 115.32 SM1 0.686 0.652 14.0823 313 4.5036 5 90.07 0.676 0.701 13.4613 313 4.3050