仪器课件高效液相色谱法总结.ppt

16-6-3 流动相 最常用的是水缓冲溶液，有时也使用有机溶剂如甲醇，或乙醇同水缓冲溶液混合使用，以提供特殊的选择性，并改善试样的溶解度。 所用的缓冲溶液，通常由下列化合物配制：钠、钾、铵的柠檬酸盐，磷酸盐，甲酸盐与其相应的酸混合成酸性缓冲溶液或氢氧化钠混合成碱性缓冲溶液等。 16-6-4 应用 主要是用来分离离子或可解离的化合物。它不仅适用无机离子混合物的分离，亦可用于有机物的分离，例如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子。 16-7 排阻色谱法 16-7-1 分离原理 亦称空间排阻色谱或凝胶渗透色谱法。是一种根据试样分子的尺寸进行分离的技术。主要用于较大分子的分离。与其他液相色谱方法原理不同，它不具有吸附、分配和离子交换作用机理，而是基于试样分子的尺寸和形状不同来实现分离的。 尺寸排阻色谱是按分子大小顺序进行分离的一种色谱方法。其固定相为化学情性多孔物质-凝胶，它类似于分子筛，但孔径比分子筛大。凝胶内具有一定大小的孔穴，体积大的分子不能渗透到孔穴中去而被排阻，较早地被淋洗出来；中等体积的分子部分渗透；小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱柱。 这样，样品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流出。 16-7-2 排阻色谱的填料和流动相 根据填料的来源可分为有机和无机填料。 有机填料如交联聚苯乙烯凝胶，是目前使用最多的一种填料，