第12章转录.ppt

（一）原核生物的RNA聚合酶 [组成]：5个亚基，?2??’?为全酶， ?2??’为核心酶。（如图） [作用]： ? 识别DNA分子中转录的起始部位。 ?促进与模板链结合，并使DNA双链打开17bp.。 ?催化NTP的聚合，完成一条RNA链的聚合反应。 ?识别转录终止信号，停止聚合反应，参与转录水平的调控。（如图 ） ?缺乏外切酶活性,无校对功能. 三、转录过程（DNA指导下的RNA合成） DNA 转录 RNA前体 加工 成熟RNA的过程 RNA合成的两种方式： 1、 DNA指导的 RNA合成。 2、 RNA指导的 RNA合成。 1、原核启动子： 启动子：是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列， [结构]约55bp,分为起始点、结合部位、识别部位。 [功能] ?起始点:转录起始部位以+1表示，转录的第1个核苷 酸常为嘌呤---G,A。 ?结合部位：约6bp组成,是高度保守区,共有序列 为5’-TATAAT-3’ ,位于起始点上游-10。因Tm低,DNA易解开双链，为RNA聚合酶提供场所。 ?识别部位：约6bp组成,在-35处,为高度保守区,序 列5’-TTGACA-3’, ?因子识别此部位。 起始位点的识别 2、真核启动子结构 ?于-25处含AT富集区, 共有序列TATAA（TATA box） ?-70处含共有序列CAAT ,还含许多其它box ,例如 GC box,E-box等。 ?含增强子[enhancer]和静息子[silencsr] RNA聚合酶催化的反应 RNA链的延伸图解 RNA合成过程 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 帽子结构 第二节 RNA的复制合成（RNA指导的RNA合成） 正链RNA病毒：病毒RNA的碱基序列与mRNA完全相同者，称为正链RNA病毒，这种病毒RNA可直接起病毒mRNA的作用，附着到宿主细胞核糖体上，翻译出病毒蛋白。 从正链RNA病毒颗粒中提取出RNA，注入适宜的细胞时有感染性。 负链RNA病毒：病毒RNA碱基序列与mRNA互补者，称为负链RNA病毒，负链RNA病毒的颗粒中含有依赖RNA的RNA聚合酶，可催化合成互补链，成为病毒mRNA，翻译病毒蛋白，从负链RNA病毒颗粒中提取出的RNA，而无感染性。 2、病毒RNA的复制方式：病毒RNA的种类很多，其复制的方式也是多种多样的，归纳起来可以有下列几种： （1）病毒含有正链RNA，先合成复制酶，复制后合成其他蛋白质进行装配 。 单链+RNA→－RNA→+RNA→蛋白质 （2）病毒含有负链RNA和复制酶，先合成正链，再合成病毒蛋白和复制病毒RNA 。 单链-RNA→+RNA→蛋白质 （3）病毒含有双链RNA和复制酶，先复制正链，再翻译成病毒蛋白，最后合成负链，形成双链RNA分子 。 双链±RNA→+mRNA→蛋白质 （4）致癌RNA病毒，该类病毒首先以自身RNA为模板，经逆转录酶的催化，形成RNA—DNA杂交分子，再以单链DNA为模板，合成双链DNA，后者整合到宿主细胞的DNA上，进而合成若干子代单链RNA 单链+RNA→DNA→±DNA→+mRNA→蛋白质 本 章 结 束 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子（promoter) 终止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 （三）转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 1. 非依赖 ρ因子的转录终止 DNA模板接近转录终止的区域内，有较密集 的A-T配对区或G-C配对区，且G-C配对为回 文结构。 转录产物RNA的3′-末端有若干个连续的U。 连续U区的5′-端前方碱基形成茎环结构或发 夹结构。这种二级结构是阻止转录继续向下 游推进的关键。 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` 5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` RNA 5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT... 3? DNA UUUU...…