HIF1α调控Notch1通路对乳腺癌生物学行为的影响与机制研究.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………．2 英文论著摘要………………．……………………………6 二、英文缩略语……………………………………………．．11 三、论文 论文一．．…………………………………………………13 材料………………………………………………．．…．13 方法……………………………………………………14 实验结果……………………………………．．…………16 讨论…………………………………………．………．．20 论文二…………………………………………．．．……．．23 材料………………………．…………………．…．……23 方法…………………………………………．………．．25 实验结果………………………………………………．．28 讨论……………………………………………………40 本研究创新性的自我评价……………………………………43 参考文献………………………………………………．．44 四、附录 综述…………………．……………………．．………．．46 致谢…………………………………………………．．66 个人简介………………………………………………．67 中国医科大学 博士学位研究生论文摘要 ·中文论著摘要· l F一1 论文题目：H Q调控Notch-1通路对乳腺癌生物学行为 的影响及机制研究 01 95 学 号：20081 专 业：肿瘤学 姓 名：赵婷婷 导 师：李继光 简介：细胞的特性及其生物学行为与其所处的微环境之间存在重要的关系。肿 瘤细胞的快速增殖及肿瘤血管的异常，常常导致实体肿瘤中呈缺氧状态，以往我 们认为缺氧及缺氧诱导因子主要影响细胞的代谢和血管的重塑，但现在发现缺氧 诱导因子在肿瘤的增殖、分化、侵袭转移产生重要的影响。此外，还发现缺氧诱 导因子可以直接与一些细胞信号转导通路中的关键分子发生反应，如cMyc和 P53。本文旨在探讨HIFs的亚基，HIF一1Q与肿瘤之间的密切联系，进而深入研 究其与肿瘤发生、发展的关系。 目的：分析HIF一1Q，缺氧相关蛋白vEGF—a，GLUT一1在非特殊性浸润性乳腺癌 中的表达情况，运用流行病学与统计学方法分析HIF一1Q与乳腺癌临床病理学特 点及预后的关系；明确HIF一1Ⅱ的表达对乳腺癌细胞系生物学行为的影响，探索 其中起主要作用的细胞信号转导通路；动物实验验证HIF一1Q的表达对乳腺癌转 移能力的影响。 方法： 1、 采用免疫组化法检测HIF—l 性乳腺癌中的表达情况，利用卡方检验分析HIF-IQ的表达与乳腺癌临床病理特 点的关系：采用K—M法及Logrank检验分析HIF一1Q的表达与乳腺癌患者预后的 2 关系；利用Kendall及Spearman非参数检验分析HIF一1 的表达水平的相关性；利用Cox多因素检验分析HIF一1 达与临床病理资料的危险因素关系。 2、 在乳腺癌细胞系中直接低氧或者化学刺激的方式诱导缺氧，利用 Western Blot方法检测低氧对乳腺癌细胞中HIF一1Q表达的影响；利用MTT， Transwel l方法检验HIF一1Q表达对乳腺癌细胞系生长，侵袭能力的影响；利用 Western Blot，共聚焦免疫荧光等方法检测HIF-1Q表达对乳腺癌细胞系EMT状 态的影响，全基因组表达芯片筛查HIF一1Q诱导乳腺癌细胞EMT的分子通路；利 用双荧光素酶报告基因，共聚焦免疫荧光等实验验证在缺氧状态下HIF—lQ对 NOTCH一1通路的激活情况。 3、 动物实验利用裸鼠尾静脉注射正常或干扰HIF-1Q表达的乳腺癌细胞， 通过检测两组细胞在小鼠肺部形成转移瘤的能力考察HIF-1Q表达对乳腺癌细 检验HIF一1 Q对乳腺癌细胞EMT状态的影响及对NOTCH一1通路