第四章 生命密码-核酸2014.pptVIP

用于小片段DNA的分析 相对分子质量小于1000bp的DNA片段和RNA的电泳。 PAGE中一般不含RNase，用于RNA分析时不会分解样品。 2、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 4.5 核酸的生物功能 1、中心法则 2、复制 3、转录 4、翻译 Reverse transcription 1、中心法则-Central Dogma 复制：亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 2、复制-Replication 半保留复制 前导链 滞后链 冈崎片断 转录过程 起始位点的识别 recognition 转录起始 initiation 链的延伸 elongation 转录终止 termination 转录后加工 modification 3、RNA的生物合成(转录)- Transcription 转录过程的特点 转录酶 转录的不对称性：在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 反义链 antisense strand（无意义链，负链）：在RNA的转录中，用作模板的DNA链称为反义链。 有义链 coding strand（编码链，正链）：在RNA的转录中，不作为模板的DNA链称为有义链。 转录所需酶：依赖DNA的RNA聚合酶又称为转录酶，是以DNA为模板的一类RNA聚合酶。在原核生物和真核生物中，转录酶有所不同。 The E. coli RNA polymerase holoenzyme consists of six subunits: a2bb’? s. Possible catalytic subunits Promoter specificity Enzyme assembly, promoter recognition, activator binding Role unknown (not needed in vitro) 36.5 kDa 151 155 11 kDa (32-90 kDa) Reverse translation 逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成DNA的过程。 反转录 3、翻 译 肽链合成的起始 initiation 肽链合成的延伸 elongation 肽链合成的终止与释放 termination and release 蛋白质 核糖体 mRNA 本章回顾 DNA－ Z螺旋 ?DNA －A螺旋  ?????DNA －B螺旋 本章回顾 本章回顾 4.3 核酸的物理化学性质 4.4 核酸的研究方法 4.5 核酸的生物功能 * * * DNA的超螺旋结构 （一）原核生物DNA的高级结构 在共价闭环双螺旋基础上进一步扭转盘曲,形成超螺旋(supercoil)体积进一步压缩。 不同形状的DNA分子在琼脂糖中的迁移率 松弛型，OC, Open circular DNA 超螺旋, CCC, covalently-closed circular DNA Linear DNA 从细菌抽提得到的质粒DNA 样品中不含线状DNA （二）真核生物DNA分子高级结构：多层次压缩包装 4.2.5 DNA与蛋白质形成复合物的结构－－四级结构 生物体内的核酸通常都与蛋白质结合形成复合物，以核蛋白（nucleoprotein）的形式存在。DNA分子十分巨大，与蛋白质结合后被组装到有限的空间中。形成染色体－高级结构。 １、病毒 ２、细菌拟核 ３、真核染色体 噬菌体T2结构 头部 颈圈 尾部 基板 尾丝 尖钉 动物病毒切面模式图 被膜（脂蛋白、碳水化合物） 衣壳（蛋白质） 核酸 突起（糖蛋白） 病毒粒 细菌拟核（nucleoid ）的突环结构 RNA-蛋白质核心 突环由双链DNA结合碱性蛋白质组成 平均一个突环含有约40 kbDNA 组蛋白与DNA的结合 核小体 核小体盘绕及染色质示意图 真核生物内，DNA以致密形式存在于细胞核的染色体中。 染色体的基本单位是核小体(nucleosome) 核小体：由DNA和组蛋白共同构成。 核心组蛋白：4种组蛋白(H2A , H2B , H3 ,H4)形成的8聚体 DNA：以负超螺旋(左手)缠绕在核心组蛋白上 H1在核小体之间起连接作用 染色体的基本单位是核小体(nucleosome) 4.2.6 RNA的分子结构 RNA一级结构 和类别 tRNA 的分子结构 rRNA的分子结构 mRNA的分子结构 RNA的一级结构 RNA分子中各核苷之间的连接方式（3′-5′磷酸二酯键）和排列顺序叫做RNA的一级结构 OH OH OH 5′ 3′ RNA与DNA的差异 DN