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胎盘间充质干细胞的制备 胎盘MSC的分离 1、酶消化法 胶原酶Ⅳ+羟乙基淀粉沉淀组 胶原酶Ⅱ+羟乙基淀粉沉淀组 胶原酶Ⅱ+淋巴细胞分层液分离组 胶原酶Ⅱ+氯化铵裂解红细胞组 胶原酶+胰酶 胶原酶Ⅳ+DispaseⅡ 2、组织块培养法(原代培养时间长） 应用前景 1、在造血干细胞移植中的应用 造血干细胞和MSC共移植可以促进造血干细胞重新建造血微环境。 胎盘来源的MSC具有免疫调节作用，并且由于其处在母婴耐受交界面，在免疫调节上具有一些其他来源MSC不同的性质，因此在治疗GVHD时可能会具有独特的优势。 2、治疗自身免疫性疾病 3、治疗组织损伤 肝脏疾病，如病毒性肝炎、酒精肝、脂肪肝引起的肝纤维化。神经系统疾病，如帕金森症。 * * 胎盘干细胞 脐带组：谢晓燕 主要内容 胎盘构造 胎盘干细胞概述 胎盘干细胞的优缺点 胎盘干细胞的种类： 胎盘造血干细胞 胎盘亚全能干细胞 胎盘间充质干细胞 胎盘概述 胎盘（placenta）是母体与胎儿间进行物质交换的器官，是胚胎与母体组织的结合体。 由羊膜（amniotic membrane）、叶状绒毛膜（chorion frondosum）和底蜕膜构成。 胎盘组织由滋养细胞、间充质干细胞和血管共同组成，为免疫“豁免”的组织。 胎盘又叫胞衣、衣胞、紫河车、胎衣、胎膜。 胎盘干细胞 概念 胎盘干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一族亚全能干细胞。 特点 使用不需配型 数量丰富 分化能力强 没有伦理学问题 胎盘干细胞的种类 目前已知证明的胎盘干细胞包括： 造血干细胞 间充质干细胞 亚全能干细胞 血管干细胞 皮肤干细胞 神经干细胞等 胎盘造血干细胞 概述 胎盘是一个造血组织，从胚胎形成后3周开始造血。胎盘组织中存在大量造血干细胞。 公认的人造血干细胞的表面标记有CD34+、CD38-Lin-、CD45RA-、c-kit+、CD71-以及近年来新发现的CD43。 胎盘造血干细胞表达许多与胎肝和骨髓来源造血干细胞相同的标记。 CD133是较CD34更为原始的造血干/祖细胞表面标志，其膜抗原可作为胎盘造血干/祖细胞的分选标志。  胎盘造血干细胞的制备 1、灌注法 AMD3100灌注法 AMD3100是基质细胞衍生因子（SDF-1）受体CXCR4的拮抗剂，能有效与CXCR4结合，阻断SDF-1与CXCR4的结合；能快速动员造血干细胞/祖细胞。 酶消化液灌注法 2、酶消化法 主要应用中性蛋白酶、胰蛋白酶及胶原酶进行组织块消化  胎盘造血干细胞的制备 酶消化液灌注法： 对新鲜娩出胎盘立即进行预处理，然后分离出脐动脉和脐静脉； 用清洗液灌注胎盘绒毛血管，收集灌注后的清洗液； 用酶消化液灌注胎盘绒毛血管，置37℃温度下消化5～20min； 用收集液灌注胎盘，收集灌注后的液体； 将得到的液体离心，弃上清后重悬细胞； 重悬的细胞悬液经羟乙基淀粉和淋巴细胞分离液两步法分离，得到临床应用级胎盘造血干细胞。 胎盘造血干细胞的应用前景 运用流式细胞计数技术检测脐血、胎盘血、胎盘中造血干细胞（CD34+CD38-细胞）以及造血祖细胞（CD34+CD38+细胞）的含量 造血干细胞 造血祖细胞 脐血 0.06±0.01% 0.31±0.05% 胎盘 0.39±0.21% 1.1±0.79% 胎盘血 0.06±0.04% 0.43±0.16% 人足月胎盘可以提供大量的CD34 阳性、CD133 阳性细胞以及其他原始的造血祖先细胞，适合人类移植。 由胎盘取得的造血干细胞或培养出的群落形成单元的总数量可以是同一来源脐带血可得造血干细胞的10 倍。 脐带血分离的干细胞数量少会限制它使用的有效性，只能用在一个幼儿或少年患者的移植 胎盘可以提供自体干细胞足够的数量重建成年人的造血系统。 胎盘来源的CD34+CD38+ 、CD34+CD38-两个造血干/祖细胞亚群均具有增殖分化为粒细胞-单核细胞集落生成单位、红细胞爆裂型集落生成单位、混合集落生成单位的能力。 人胎盘组织具有淋巴细胞亚群低比例和抑制性T细胞高比例的特性。  胎盘亚全能干细胞 概述 胎盘亚全能干细胞是来源于新生儿胎盘组织的一族胚胎后亚全能干细胞（Post-embryoni pluripotent stem cells）。 在发育阶段与胚胎干细胞接近，具备分化形成三个胚层的组织细胞的能力。 与胚胎干细胞的不同之处是不会形成畸胎瘤，这一特性使亚全能干细胞可以直接用于体内而不必担心在体内产生畸胎瘤。 胚胎发育成熟后逐渐失去部分原始干细胞表型，但在胚胎发育为成体后仍具有亚全能基因组，其中组织特异性基因在适当的微环境下可以被激活，因各自所处的微环境不同而向不同的组织分化，能够全方位地选择分化为各种组织细胞。 亚全能干细胞作为胚胎干