9需氧革兰阳性杆菌.ppt

需氧革兰阳性杆菌 临床意义 引起人、蓄共患的急性传染病，包括皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽、败血性炭疽，烈性传染病, 死亡率极 致病因子： 荚膜：抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散 炭疽毒素：保护性抗原、致死因子、水肿因子 病后可获得持久免疫力 炭疽芽胞杆菌 培养特性 普琼平板：灰色、粗糙型菌落；卷发状边缘（低倍镜下） BAP：不溶血 NaHCO3 BAP： －－有毒株产生荚膜呈黏液型菌落，挑取时呈粘丝状(鉴别要点) －－无毒株—粗糙型菌落 生化反应 葡萄糖+ 、麦芽糖+ 、蔗糖+、 卵磷脂酶弱+、触酶+ 硝酸盐还原试验+、VP＋、吲哚－、硫化氢－、柠檬酸盐－、尿素－ 明胶液化＋ 胨化牛乳：在牛乳中生长2～4天后牛乳凝固并缓慢胨化 抗原 菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热，特异性不高，病兽脏器皮毛加热后仍可与相应抗体反应，称Ascoli热沉淀反应 荚膜多肽抗原：抗吞噬，与毒力有关 芽胞抗原： 炭疽毒素Anthrax toxin： 由保护性抗原、致死因子、水肿因子形成。 抵抗力 耐热、耐干燥 对氧化剂敏感 对青霉素、磺胺类抗生素敏感 微生物学检查 标本的采集：分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液等，严禁宰杀解剖死蓄。 标本的处理：液体标本取沉渣分离培养；固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非芽胞菌；血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养 戊烷脒多粘菌素琼脂 基础培养基?25μg/L戊烷脒: 杀灭利什曼原虫等寄生虫 3000IU/L多粘菌素?2%脱纤维羊血???? 检验方法 涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞—初步报告 荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验 核酸检测：核酸杂交 分离培养：BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。 2%兔血清肉汤增菌→分离培养 鉴定试验 菌落特征 形态染色 生化试验:表13－1 串珠试验: 接种于含青霉素(0.05～0.5U/ml)的肉汤中，37℃ 6h，大而均匀成串的圆球状菌体，与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关，类炭疽无此现象 临床意义 食物中毒：含菌量达105/g以上，夏、秋季多见，中毒食物大多无腐败、变质现象，感官性状正常，应引起注意 呕吐型——耐热肠毒素 腹泻型——不耐热肠毒素 全眼球炎（外伤后） 心内膜炎、败血症和脑膜炎 蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus 形态：革兰阳性大杆菌、两端钝圆、有芽胞、周鞭毛、无荚膜 培养特性：需氧或兼性厌氧，最适温度30~35℃，营养要求不高。 普通琼脂平板：菌落较大，灰白色，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，有蜡样光泽 BAP 有β溶血 卵黄平板—生长迅速，培养3h后，虽看不到菌落，但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环，称乳光反应或卵黄反应 生化反应 葡萄糖＋、蔗糖＋、麦芽糖＋等 卵磷脂酶+ 、VP＋ 胨化牛乳＋、液化明胶＋， 多次传代后生化特性常可改变 微生物学检查 结果解释 因食品暴露于空气中，在一定程度都会受到本菌污染，所以不能分离出该菌就认为是引起食物中毒的病原菌。 从食物中分离出菌数≥105CFU/g，提示本菌活跃生长，构成潜在危险 从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或)呕吐物中分离到的菌株属同一血清型 三、枯草芽胞杆菌 生物学性状——形态染色 革兰阳性大杆菌、两端钝圆 有芽胞、无荚膜、有鞭毛 培养特性 BM：灰白色、不透明、干燥、锯齿状粗糙大菌落 BAP：β溶血大菌落 生化反应 触酶+ 葡萄糖＋、甘露醇＋、木糖＋、阿拉伯糖－ 串珠试验－ 卵磷脂酶－ 炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的鉴别 鉴别项目 炭疽芽胞杆菌 枯草芽胞杆菌 蜡样及其他芽胞杆菌 形态 菌体两端平截、长链 两端钝园、短链 两端钝园、短链 荚膜 多肽荚膜 － － 动力 － + + 菌落 卷发状，有毒株为M型 锯齿状、R型 蜡样或R型 肉汤生长 絮状沉淀、上层清 形成菌膜 均匀混浊有菌膜 卵磷脂酶 +