分选型流式细胞仪简介.pptVIP

当细胞或者其他微粒通过聚焦的激光束时，它们发出散射光并发射荧光。由于每个激光束都聚焦在很小的点上，并且微粒通过流动池速度很快，因此散射光或者荧光发射的时间很短-往往只有几微秒。PMT将这些光信号转换为电子信号，称为脉冲。 参数是脉冲的特性之一，它是由单一的光电倍增管或者光电二极管产生，用于测定荧光或者散射光。可以测定脉冲的三个特性：面积，高度或者宽度。 当微粒通过激光束时，脉冲开始。此时，激光强度和信号强度都很低。 当微粒达到激光束中间时，脉冲达到最大强度或者高度，此时激光束和信号强度都最高。此时测定峰值强度或者脉冲高度。 当微粒离开激光束时，脉冲减弱。 * FCS 2.0格式 常以列表模式（LIST MODE)：将每个细胞的每个检测参量依次排列顺序存储 * 液流振荡形成液滴（每个液滴内含有一个细胞）、在断裂成液滴前加上电荷（两种或四种电荷）、在高压偏转板形成的电场下发生不同角度的偏转、落入相应的分选收集装置中。 * 八角和三角检测器是BD专利的探测器阵列，利用一系列光的反射将光信号引导到目标探测器中，得到高效的光信号收集和最大的光信号保留。BD这种序列反射的设计提高了仪器的灵敏度，首先收集最暗的发射光信号，从最长的波长（通常为PE-Cy?7）开始收集，依次到最短的波长（FITC）。 * 在BD FACSAria流式细胞仪上，细胞受激光激发时，通过激光照射区的流速更慢，激