大鼠肝细胞原代培养模型的研究简介.pptVIP

大鼠肝细胞原代培养模型的研究 摘要 目的: 为肝细胞功能及相关的研究提供一种客观的、简便的大鼠肝细胞原代培养模型, 并鉴定肝细胞的功能。 方法: 在传统的两步灌流法的基础上代肝细胞的细胞周期和细胞凋亡情况。 结果: 分离得到的肝细胞成活率可达90% 以上, 纯度 可达95%以上; 流式细胞术结果表明原代肝细胞大 多处于G0、G1 期, 且基本无凋亡 。 结论: 体外培养的肝细胞活力和纯度均较高, 体外培养后细胞功能正常, 是一种实用的体外研究肝细胞良好的细胞学模型。 关键词 ：大鼠; 肝细胞; 原代培养; 细胞模型; 中图分类号: R965. 1 文献标识码: A 文章编号: 1009-2501( 2005) 07-0743-0 1 材料与方法 1. 1 主要材料 SPF( special pathogen free) 级雄性Sprague-Dawley 大鼠, 体重150~ 200 g。 1. 2 大鼠原代肝细胞培养和细胞纯度及活率鉴定 以0. 6% 戊巴比妥钠麻醉大鼠, 开腹, 分离肝门静脉, 经门静脉插管, 开放下腔静脉, 以流速5ml／min- 1灌流500 ml 37 ℃ 的前灌流液( 142 mmolNaCl、6. 7mmol KCl、10 mmol HEPES、pH