分子生物学蛋白质生物合成解说.ppt

第　十二　章 Protein Biosynthesis (Translation) 　 　 第一节 蛋白质生物合成体系 Protein Biosynthesis System 　 　 1961年，Nirenberg 证明了mRNA的模板作用。 　 开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 　 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 遗传密码表 许多真核生物基因转录后有一个对mRNA外显子加工的过程，可通过特定碱基的插入、缺失或置换，使mRNA序列中出现移码突变、错义突变或无义突变，导致mRNA与其DNA模板序列不匹配，使同一前体mRNA翻译出序列、功能不同的蛋白质。这种基因表达的调节方式称为mRNA编辑（mRNA editing）。 　　　密码子简并性的生物学意义：减少有害突变。 　　 　遗传密码的特异性主要取决于前两位碱基。　 　　　GCU　　　　　　　 ACU 　　　GCC　　　　　　　 ACC 　　　GCA　　　　　　　 ACA 　　　GCG　　　　　　　 ACG 从简单的病毒到高等的人类，几乎使用同一套遗传密码，因此，遗传密码表中的这套“通用密码”基本上适用于生物界的所有物种，具有通用性。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 原核生物核蛋白体至少有六个功能部位： ①容纳mRNA的部位； ②结合氨基酰tRNA的氨基酰 (aminoacyl site，A位)； ③结合肽酰tRNA的肽酰位(peptidyl site，P位)； ④tRNA排出位(exit site，E位)； ⑤肽基转移酶所在的部位； ⑥转位酶位点。 第二节氨基酸的活化 Activation of Amino Acids 氨基酸与特异的tRNA结合形成氨基酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。 参与氨基酸的活化的酶：氨基酰-tRNA合成酶。 氨基酸的活化形式：氨基酰－tRNA 氨基酸的活化部位：α－羧基 氨基酸与tRNA连接方式：酯键 氨基酸活化耗能：2个~P 二、起始肽链合成的氨基酰-tRNA 真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet 第三节 蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 肽链的生物合成过程是翻译的中心环节。翻译时，从mRNA的起始密码子AUG开始，按5ˊ→3ˊ方向逐一读码，直至终止密码子。于是，合成中的肽链从起始甲硫氨酸开始，从N-端→C-端延长，直至终止密码子前一位密码子所编码的氨基酸。 　 　蛋白质合成中 　　　mRNA模板的方向：5′→ 3′； 　　　蛋白质的合成方向：N端→ C端。 　蛋白质合成过程： 　　　起始 　　　延长 　　　终止 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 　　　(translational initiation complex)。 参与起始过程的蛋白质因子称起始因子（initiation factor，IF）。 原核生物mRNA在核蛋白体小亚基上的准确定位和结合涉及两种机制： 在各种mRNA起始AUG上游约8～13核苷酸部位，存在一段由4～9个核苷酸组成的一致序列，富含嘌呤碱基，如-AGGAGG-，称为Shine-Dalgarno序列(S-D序列)，又称核蛋白体结合位点(ribosomal binding site, RBS)。一条多顺反子mRNA序列上的每个基因编码序列均拥有各自的S-D序列和起始AUG。 指在mRNA模板的指导下，氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。 肽键的形成 EF-G有转位酶（translocase）活性，可结合并水解1分子GTP，释放的能量促进核蛋白体向mRNA的3′侧移动，使起始二肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核蛋白体P位，而卸载的tRNA则移入E位。 　 氨基酸活化：2个~P ATP 起始： 1个 GTP 延长： 2个 GTP 终止： 1个 GTP 结论：每合成一个肽键至少消耗4个~P。 真核生物翻译起始因子 真核生物翻译起始的特点 核蛋白体是80S； 起始因子种类多； 起始tRNA的Met不需甲酰化； mRNA的5’帽子和3’poly A尾结构与mRNA在核蛋白体就位有关； 起始tRNA先与核蛋白体小亚基结合，然后再结合mRNA 第四节蛋白质翻译后修饰和靶向输送 Posttranslational Modification and Targeting Transfer of Prote