Lec13_Citric acid cycle-st.ppt

Citric Acid Cycle 细胞呼吸作用 细胞消耗O2、产生CO2的分子工程 三个阶段： 阶段1：脂肪酸、葡萄糖和某些氨基酸氧化得到乙酰CoA 阶段2：乙酰CoA进入三羧酸循环，并在酶催化作用下被氧化为CO2，能量贮存在NADH和FADH2分子中 阶段3：NADH和FADH2将接受的电子传递给线粒体的电子载体链，最后还原O2生成H2O。电子流动驱动ATP的生成。 * 胞质溶胶 线粒体 乙酰CoA的产生 氧化脱羧反应 不可逆的氧化过程 丙酮酸脱氢酶复合体（PDH） 3种酶 + 5种不同的辅酶或辅基 定位：真核细胞的线粒体中和原核细胞的胞质溶胶中 高能硫酯键 * 丙酮酸脱氢酶复合体 3种酶 + 5种不同的辅酶或辅基 E1：丙酮酸脱氢酶，硫胺素焦磷酸（TPP） E2：二氢硫辛酰转乙酰酶，硫辛酸，CoA-SH E3：二氢硫辛酰脱氢酶，NAD+ ，FAD 以多个拷贝存在 * 三羧酸循环 首先由乙酰CoA与草酰乙酸缩合生成含3个羧基的柠檬酸，再经过4次脱氢、2次脱羧，生成4分子还原当量和2分子CO2，重新生成草酰乙酸。 * 三羧酸循环 由8步代谢反应组成 消耗乙酰CoA的机构 2次脱羧生成 2CO2 4次脱氢生成 3NADH + 3H+ 1FADH2 1次底物磷酸化生成 1GTP/ATP * 1. 柠檬酸的形成 乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸 由柠檬酸合酶催化 * 2. 柠檬酸异构为异柠檬酸 通过顺乌头酸酶催化 反应中间产物：顺乌头酸 反应：脱水，加水 结果：-H 和 -OH 互换位置 * 3. 异柠檬酸氧化脱羧 通过异柠檬酸脱氢酶催化 第一步氧化脱羧反应 产生NAD(P)H 生成α-酮戊二酸 * 4. α-酮戊二酸氧化脱羧 通过α-酮戊二酸脱氢酶复合体催化，第二次氧化脱羧反应 产生NADH 5. 琥珀酰CoA转化成琥珀酸 通过琥珀酰CoA合成酶 催化 底物水平磷酸化 高能硫酯键水解 驱动GDP合成GTP（或ATP） * 6. 琥珀酸氧化成延胡索酸 通过琥珀酸脱氢酶催化，辅基FAD。 真核细胞，结合在线粒体内膜上；原核细胞，结合在细胞质膜上。TCA中唯一一种与膜结合的酶。 产生FADH2 丙二酸，琥珀酸类似物，是琥珀酸脱氢酶的强竞争性抑制剂，能够阻断三羧酸循环。 * 7. 延胡索酸水化成苹果酸 通过延胡索酸酶催化 8. 苹果酸氧化生成草酰乙酸 L-苹果酸脱氢酶催化 产生NADH + H+ * 标准热力学条件下，反应的方向向左 但是由于草酰乙酸与乙酰CoA不断地合成柠檬酸，使细胞中的草酰乙酸浓度很低，从而反应向右进行 一轮TCA的结算 乙酰CoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O CoA-SH + 3NADH + FADH2 + GTP + 2H+ + 2CO2 2C的乙酰CoA结合草酰乙酸形成柠檬酸进入循环 2个碳原子在异柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶复合体的催化下氧化脱羧以CO2的形式释放 * 一轮TCA的结算 乙酰CoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O CoA-SH + 3NADH + FADH2 + GTP + 2H+ + 2CO2 氧化释放的能量贮存 1 NAD+ 在异柠檬酸的氧化脱羧反应中被还原 1 NAD+ 在α-酮戊二酸的氧化脱羧反应中被还原 1 FAD 在琥珀酸的氧化过程中被还原 1 NAD+ 在苹果酸的氧化过程中被还原 1个高能磷酸酯键（GTP）的产生：琥珀酰CoA ? GDP * 氧化磷酸化 产生ATP 能量的结算 * 能量的结算 每分子的葡萄糖可产生多大32个分子的ATP 葡萄糖?2×丙酮酸：2ATP + 2NADH ? 7ATP 丙酮酸?乙酰CoA：2NADH ? 5ATP 乙酰CoA?TCA：3NADH + FADH2 + GTP ? 10ATP 葡萄糖 ? 2×丙酮酸 ? 2×乙酰CoA ? TCA ? 氧化磷酸化 7ATP + 2×5ATP + 2×10ATP = 32ATP 32×30.5 kJ/mol = 976 kJ/mol 976kJ/mol / 2840 kJ/mol = 34%。经过能量修正，~65%能量被贮存起来 * TCA在代谢中的作用 两栖途径：合成代谢 分解代谢 * 脂肪酸，固醇 谷氨酸 嘌呤 卟啉，血红素 嘧啶 添补反应补充TCA的中间物 中间物被移走作生物合成的前体，可通过添补反应得到补充 TCA中间物的浓度几乎保持恒定 * 当TCA缺少草酰乙酸或任何中间物时，丙酮酸羧化酶催化丙酮酸与CO2的可逆羧化反应，生成草酰乙酸 能量由ATP提供 乙酰CoA过量