检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质总结.pptVIP

* * * Page ? * * * Page ? * LOGO 复习目标 1．通过对实验结果的分析归纳，理解实验原理． 2．初步学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法和某些化学试剂能够使生物组职中的有关有机化合物产生特定的颜色反应． 命题趋势 本实验中实验基本方法的应用和运用某些化学试剂与生物组织中有关化合物的特定颜色反应来判断化合物是考查的重点．多以选择题形式出现。 还原性糖+斐林试剂→砖红色沉淀 还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖 非还原性糖：蔗糖、淀粉等 + → 本实验成功的关健在于实验材料的选择．好的材料可以提高实验效果。 可溶性还原糖的鉴定；还原糖的含量，生物组织中有无色素的影响实验结果及其观察的最重要因素．因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果，梨最好，也可用白色的甘蓝叶、白萝卜替(不能选西瓜）经实验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果，梨、白色甘蓝叶．白萝卜。 如果植物组织中积累的成分是淀粉那就无法检测到还原性糖。有些植物尽管含有较多的还原性糖，但如果本身含有叶绿素或其他色素，这些色素就会影响实验现象起到遮盖作用。这些都不适宜做实验材料。 苹果和梨是比较理想的实验材料。 苹果、研钵、小刀 斐林试剂A液、斐林试剂B液、二氧化硅 量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管 漏斗、纱布 火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯 取一个洗净的苹果切下一块，去皮，然后切成小块，取一部分切成小块的苹果放在研钵中，加入少许二氧化硅（石英砂），然后研磨，将研钵中加入少量水继续研磨。 将玻璃漏斗插入试管中，在漏斗上垫一层纱布，将组织研磨液进行过滤，得到苹果的组织样液。 用量筒取两毫升组织样液，再用量筒取两毫升新配制好的斐林试剂。 取一只试管，将量好的苹果组织样液倒入试管中，然后将量好的斐林试剂倒入试管中，震荡试管使溶液混合均匀，我们可以看到此时溶液呈蓝色。 将这只试管放入盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸。 溶液的颜色开始是蓝色，然后慢慢变成砖红色。 这个实验就证明了，苹果中含有还原性糖的存在。 溶液的颜色从蓝色变成砖红色。 苹果中含有还原性的糖。 脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色 取少量脂肪样液，加入苏丹Ⅲ，震荡，可看到溶液呈了橘黄色，本实验我们用苏丹Ⅲ做染液。 脂肪的鉴定时所用材料一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求，将花生种子浸泡3～4h ，使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则组织太软，切下的薄片不易成形。 芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒太小，不利于切片制作。 玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也较小，因此也不适合做实验材料。 花生是比较理想的实验材料 我们选用花生 显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿 50%的酒精、苏丹Ⅲ、清水 取一粒浸泡过的花生种子，去皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将这些材料放入盛有清水的培养皿中。 取一片载玻片，用纱布擦净，用毛笔取一片最薄的材料，放在载玻片中央。 用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹Ⅲ染液，染色2至3分钟，用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。 在薄片上滴1至2滴体积分数为50%的酒精，洗去附色，用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。 在薄片上滴一滴清水，盖上盖玻片，制成临时装片。 在低倍镜下寻找花生种子薄片的最薄处，将这部分移至视野中央。 用显微镜观察花生种子薄片。 我们可以看到细胞中一个个圆形的小颗粒，这就是脂肪颗粒。 低倍镜下观察 高倍镜下观察 显微镜下观察到橘黄色的颗粒。 花生种子细胞中含有脂肪。 蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物 豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。 本实验我们用蛋清做实验材料，在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。 试管架、试管、吸管 蛋清稀释液 双缩脲试剂A液、双缩脲试剂B液、量筒 用量筒量取两毫升的蛋清稀释液。再用脲尿试剂A液 将量取的蛋清液和双缩脲试剂A液分别倒入到试管中，震荡均匀，此时可见试管内仍然是透明的。 再向试管中加入1至2滴双缩脲试剂B液。 震荡均匀，此时可见试管内溶液呈紫色，这就表明蛋清液中含有蛋白质。 蛋清液呈紫色。 蛋清液中含有蛋白质。 (1)斐林试剂很不稳定，故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO４溶液)分别配制、储存，使用时，再临时配制，将4～5滴乙液滴入2mL甲液中，配完后立即使用。切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。 (2) 鉴定可溶性还原糖，加热试管时，应该用试管夹夹住试管上部，放入盛开水的大烧杯加热；注意试管底部不接触烧杯底部，同时试管口不要朝