氨基酸和蛋白质资料.ppt

* 由?肽组成 至少有：?l(I)/?l(II)/?l(III)/?1(IV)和?2胶原蛋白I：[?1(I)]2?2三螺旋 五种肽链AA顺序不同，分子量介于95000到100000之间，含1000个残基左右 5、胶原蛋白的类型 总目标：增加制品纯度 1.前处理：因动/植物/细菌而异 2.粗分级分离：采用盐析/等电点沉淀/有机溶剂分级分离等方法 3.细分级分离：采用凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等 4.结晶 六、蛋白质的分离纯化 盐析 向蛋白质溶液中加入大量硫酸铵后蛋白质会沉淀析出 原因？ 蛋白质脱去水化层而聚集沉淀 盐析（（NH4）2SO4） 蛋白质的分离纯化方法 （一）根据分子大小不同的纯化方法 1、透析和超过滤 利用蛋白质分子不能透过半透膜将其 与小分子物质分开 半透膜为玻璃纸或纤维素材料 血液透析 小分子溶出 小分子被带出 透析机 透析液 加压 血液 凝胶过滤层析 蛋白质混合样 凝凝胶法只适于球状蛋白分子测量 2、密度梯度（区带）离心 60000~80000转/分 重力60万～80万倍 3、凝胶过滤 离子交换层析 利用对配体的特异生物学亲和力的纯化方法 亲和色谱颗粒 具有极强的专一性 电泳 SDS电泳 十二烷基磺酸钠 原态蛋白质 变性 ？ 磺酸基 极性亲水 烷基 亲油（蛋白质疏水区） 迁移率与电荷和形状无关，仅取决于相对分